皮質酮對大鼠再生肝鳥氨酸脫羧酶基因表達的調控.pdf

1、以部分肝切除(partial hepatectomy,PH)誘導的雄性Sprague-Dawley大鼠(體重180～200g)再生肝為材料，在PH前3天行雙側腎上腺切除術(bilateral adrenalectomies)。不同劑量外源皮質酮分散于芝麻油中皮下注射去腎上腺大鼠，每12 h 一次，直至乙醚麻醉處死。用一步法RT-PCR與Southern blot相結合的方法定量研究了大鼠再生肝中鳥氨酸脫羧酶(ornithine deca

2、rboxylase，ODC)mRNA的水平，分析了皮質酮劑量與ODC基因轉錄活性之間的關系。為闡明糖皮質激素在大鼠肝再生中的作用及其調節(jié)機制積累資料。結果如下： (1)對定量分析ODC基因表達的一步法RT-PCR的條件進行優(yōu)化，模板量為1μg肝總RNA，反轉錄30 min后分別對ODC mRNA和GAPDH mRNA進行25及22個循環(huán)數(shù)擴增。 (2)完整肝臟(PH 0 h)中，對照鼠(去腎上腺假手術鼠)ODC mRNA

3、較低；腎上腺切除導致mRNA的水平升高50％；低劑量(10mg/kg體重)、中等劑量(20 mg/kg體重)和高劑量(40 mg/kg體重)外源皮質酮處理分別降低odc表達5％、7％及64％。 (3)PH誘導的再生肝中，對照組ODC mRNA水平快速升高，在3 h顯著高于0 h近2倍；5 h達到峰值，幾乎為0 h的3倍，隨后逐漸降低；但在觀察到的實驗階段仍維持高水平，極顯著高于0 h(P<0.01)。 各個劑量外源皮質酮

4、處理組ODC mRNA水平變化趨勢與對照組相似。與對照組相比，低劑量、中等劑量、高劑量皮質酮處理，PH后再生肝ODC mRNA水平在3 h分別降低22％、36％、55％；在5 h分別降低17％、36％、63％;在7 h分別降低12％、38％、64％；在9 h分別降低20％、45％、69％;在12 h分別降低27％、46％、77％，均有極顯著性差異(P<0.01)。而去腎上腺組在對應的時間點則分別升高：11％、13％、9％、1％、4％。