miR-199靶向調(diào)控ROCK1影響腎癌細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)
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1、南方醫(yī)科大學(xué)2010級(jí)博士學(xué)位論文miR一199靶向調(diào)控ROCKl影響腎癌細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的機(jī)制研究StudyonmiR一199affectskidneycellproliferation,invasionandapoptosisbytargetingROCK1課題來(lái)源:無(wú)學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)委員陳鵬亮鄭少斌泌尿外科學(xué)術(shù)型博士研究生第一臨床醫(yī)學(xué)院丘少鵬教授胡衛(wèi)列教授周祥福教授鐘惟

2、德教授毛向明教授2015年3月20日廣州中文摘要胞系中過(guò)表達(dá)miR200c、miR141可下調(diào)ZEB2蛋白表達(dá),從而抑制腫瘤細(xì)胞的黏附和侵襲;低表達(dá)于腎癌組織的miR34a,通過(guò)調(diào)控YYl抑制腎癌細(xì)胞的增殖和侵襲:miR27a可下調(diào)FOX01表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)腎癌細(xì)胞的增殖;miR134通過(guò)靶向調(diào)節(jié)KRAS,起到抑帶1J7860腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用。同時(shí),近年來(lái)研究也發(fā)現(xiàn)miR199a低表達(dá)于。腎癌組織,可能作為一個(gè)抑癌基因

3、,參與腎癌的發(fā)生,但其作用機(jī)制及其生物學(xué)功能研究尚少,很多機(jī)制尚未完全闡明,仍具有較大的潛在研究?jī)r(jià)值。為此,我們開展了本研究。目的1探討miR199a在腎癌及癌旁相對(duì)正常組織中的表達(dá),分析其表達(dá)與腎癌患者預(yù)后的關(guān)系;2探討miR199a在腎癌中的表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的影響;3探討miR199a與其下游靶基因及上游調(diào)控基因的作用關(guān)系,闡明miR199在腎癌中的作用機(jī)制;方法1采用qRTPCR定量檢測(cè)miR199a在39例腎癌患者腫瘤

4、組織及其癌旁相對(duì)正常腎組織中的表達(dá)量,并分析miR199a在。腎癌中的表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系。2采用慢病毒感染的方法,構(gòu)建穩(wěn)定過(guò)表達(dá)miR199a的A498細(xì)胞株和空載對(duì)照組細(xì)胞株,并采用qRTPCR進(jìn)行驗(yàn)證。3采用MTT實(shí)驗(yàn)、平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腎癌細(xì)胞的增殖情況;應(yīng)用Transwell試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力;利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。腎癌細(xì)胞的凋亡情況。4通過(guò)靶基因預(yù)測(cè)網(wǎng)站,結(jié)合生物信息學(xué)分析篩選miR199a下游的候選靶基因,明確ROCKl可

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