ROCK2調(diào)控IFITM1對肝癌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：
　　通過干擾RNA使肝癌細(xì)胞HepG2及SMCC-7721中ROCK2基因的表達(dá)下調(diào)，探討ROCK2對IFITM1的調(diào)控及對肝癌細(xì)胞增殖的影響。
　　方法：
　　1、選取HepG2、SMCC-7721、Huh7三株肝癌細(xì)胞及正常肝細(xì)胞HL7702，分別檢測其ROCK2的mRNA及蛋白表達(dá)。
　　2、將ROCK2的siRNA片段轉(zhuǎn)染進(jìn)肝癌細(xì)胞株HepG2和SMCC-7721中，然后檢測ROCK2蛋白和mRN

2、A水平的變化。
　　3、將上述細(xì)胞分成：control，siRNA（－），ROCK2-siRNA三組，檢測IFITM1的蛋白表達(dá)和mRNA水平變化。
　　4、通過干擾ROCK2后用CCK8、EDU檢測細(xì)胞的增殖變化。
　　5、穩(wěn)定低表達(dá)ROCK2中干擾IFITM1后觀察肝癌細(xì)胞的增殖的變化。
　　結(jié)果：
　　1、ROCK2在肝癌細(xì)胞中mRNA及蛋白水平呈現(xiàn)相對高表達(dá)狀態(tài)。
　　2、將肝癌細(xì)胞內(nèi)的ROC

3、K2基因下調(diào)后，其mRNA和蛋白的表達(dá)均下降。
　　3、Western blot及實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示ROCK2-siRNA組 IFITM1蛋白表達(dá)和mRNA明顯升高。
　　4、ROCK2-siRNA組肝癌細(xì)胞增值受到明顯抑制。
　　5、穩(wěn)定下調(diào)ROCK2的同時(shí)干擾IFITM1后肝癌細(xì)胞的增殖較單獨(dú)干擾ROCK2組有所恢復(fù)。
　　結(jié)論：
　　下調(diào)ROCK2基因表達(dá)后IFITM1表達(dá)水平明顯升高，使肝癌