殼聚糖雙胍鹽酸鹽的制備及其對(duì)胰島素抵抗HepG2細(xì)胞的影響.pdf

1、二甲雙胍是世界各國(guó)臨床指南推薦治療2型糖尿?。═2DM）的首選藥物。殼聚糖是已被證明的具有降糖功效的天然多糖，將二甲雙胍的結(jié)構(gòu)引入到殼聚糖分子中，既利用二者優(yōu)良的降糖本領(lǐng)，又可以充分發(fā)揮殼聚糖的天然性和安全性，提高雙胍藥物的生物利用度。本文針對(duì)2型糖尿?。═2DM）的胰島素抵抗，制備了殼聚糖雙胍鹽酸鹽，從分子生物學(xué)角度深入探究其對(duì)胰島素抵抗肝癌細(xì)胞（HepG2）中關(guān)鍵生物因子的影響。
　　首先，本文分別以相對(duì)分子質(zhì)量為50KDa和

2、100KDa的殼聚糖和雙氰胺為原料，制備出了殼聚糖雙胍鹽酸鹽，分析研究了反應(yīng)溫度、反應(yīng)物摩爾比、反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)pH值等因素對(duì)制備反應(yīng)產(chǎn)率和產(chǎn)物取代度的影響，確定了最優(yōu)的制備條件為：pH值為1，殼聚糖與雙氰胺的反應(yīng)投料摩爾比為1:3，反應(yīng)時(shí)間為15min，反應(yīng)溫度為100℃。通過紫外光譜分析、紅外光譜分析和元素分析等分析手段確定產(chǎn)物基本結(jié)構(gòu)單元、組分、含量。
　　其次，采用高濃度胰島素對(duì) HepG2細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，以細(xì)胞活力值和葡萄糖

3、消耗量為指標(biāo)，建立HepG2細(xì)胞的胰島素抵抗模型。對(duì)殼聚糖雙胍鹽酸鹽進(jìn)行體外細(xì)胞毒性測(cè)試，篩選出對(duì)細(xì)胞活力影響較小的樣品。研究了殼聚糖雙胍鹽酸鹽對(duì)肝細(xì)胞葡萄糖消耗以及胰島素信號(hào)傳導(dǎo)通路中胰島素受體（InsR）和信號(hào)效應(yīng)蛋白葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2（GLUT-2）的影響。結(jié)果表明：殼聚糖雙胍鹽酸鹽能夠顯著提高胰島素抵抗HepG2細(xì)胞的葡萄糖消耗量和InsR蛋白表達(dá)量，同時(shí)降低GLUT-2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)量，有效改善HepG2細(xì)胞的胰島素抵抗情況。取