亞硒酸鈉誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞胰島素抵抗的作用及機(jī)制研究.pdf

1、硒是哺乳動物的一種必需微量元素。研究表明，硒具有類胰島素作用；而近來越來越多的研究表明，缺硒和硒過量會促進(jìn)糖尿病的發(fā)生發(fā)展，但內(nèi)在的機(jī)理仍然知之甚少。胰島素抵抗在2型糖尿病的發(fā)病機(jī)理中極其重要。因此，硒與胰島素抵抗之間關(guān)系的研究對深入了解硒與糖尿病的關(guān)系具有重要意義，對預(yù)防和治療2型糖尿病具有潛在的應(yīng)用價值。
　　本文以亞硒酸鈉Na2SeO3處理的HepG2細(xì)胞為研究對象，研究了亞硒酸鈉對胰島素效應(yīng)與信號通路的影響及其機(jī)制，重點探

2、討了高濃度亞硒酸鈉（1μM，2.5μM和5μM）對HepG2細(xì)胞的糖代謝（包括糖原合成和糖異生）、肝臟細(xì)胞中胰島素信號通路、氧化應(yīng)激水平、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平的影響，主要結(jié)果如下：
　　我們采用糖原試劑盒、實時熒光定量PCR技術(shù)、蛋白質(zhì)印跡技術(shù)、分光光度法、活性氧試劑盒，研究了亞硒酸鈉對HepG2細(xì)胞胰島素信號通路的影響及可能的機(jī)制。結(jié)果表明，高濃度亞硒酸鈉使得HepG2細(xì)胞內(nèi)糖原含量降低，促進(jìn)了糖異生基因的表達(dá)，降低了Akt的磷酸化水

3、平。這說明高濃度亞硒酸鈉導(dǎo)致胰島素敏感性降低，抑制胰島素信號傳導(dǎo)，引起胰島素抵抗。亞硒酸鈉的加入沒有改變GRP78的表達(dá)，說明在HepG2細(xì)胞中，亞硒酸鈉可能不是或主要不是通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引起胰島素抵抗的。高硒處理使細(xì)胞中 ROS含量增加，加入抗氧化劑 N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）可以降低高硒引起的ROS水平升高。NAC的加入可以逆轉(zhuǎn)由亞硒酸鈉導(dǎo)致的糖原合成減少和糖異生基因表達(dá)增加，這說明亞硒酸鈉是通過RO