內(nèi)皮素及其受體對肺癌細胞生長的作用.pdf

1、腫瘤細胞受體及其細胞信號傳導(dǎo)異常在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用，以受體及其細胞信息傳導(dǎo)為靶點的腫瘤靶向治療是近年腫瘤學(xué)研究熱點。許多惡性腫瘤細胞可大量合成、釋放內(nèi)皮素-1(Endothelin-1，ET-1)并高表達內(nèi)皮素受體(Endothelin receptor，ETR)，ET-1是強大的細胞促有絲分裂素，在一些腫瘤細胞生長和腫瘤血管新生中起重要作用，ET-1受體拮抗劑已在臨床上用于治療一些惡性腫瘤并取得令人滿意的療效。研究顯示，肺

2、癌組織及細胞株高表達ET-1及ETR，肺癌患者血漿ET-1含量較正常人高，肺癌血管存在ET-1結(jié)合位點。這些提示ET-1可能參與肺癌細胞增殖和肺癌血管生成，影響肺癌的發(fā)生發(fā)展過程。但目前ET-1對肺癌細胞增殖的作用尚未見報道。本課題通過研究ET-1對肺癌細胞生長的影響，探討ET-1在肺腺癌發(fā)展中的作用，為探索以ETR及其細胞信號傳導(dǎo)為靶點的肺癌靶向治療新途徑打下基礎(chǔ)。 本研究主要內(nèi)容包括采用反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)

3、法檢測肺腺癌SPC-Al細胞中ET-1及ETR的mRNA表達，酶聯(lián)免疫吸附劑測定法(ELISA)、蛋白印跡法(Western-blot)檢測SPC-Al細胞中ET-1及ETR的蛋白表達，四唑鹽(MTT)顯色分光光度法測定外源ET-1對SPC-Al細胞生長的影響，及測定ETR特異性拮抗劑、鈣離子通道阻滯劑對ET-1誘導(dǎo)的細胞增殖的作用。實驗結(jié)果如下： 1．SPC-Al細胞中有ET-1、ETA受體及ETB受體的mRNA表達。

4、 2．SPC-Al細胞中有ET-1、ETA受體及ETB受體的蛋白表達。 3．ET-1(10<'-15>-10<'-11>mol/L)具有促SPC-Al細胞增殖的作用，作用呈濃度依賴性，在10<'-11>mol/L10<'-9>-mol/L時作用呈飽和狀態(tài)。 4．ET-1促SPC-Al細胞增殖作用可被ETA受體拮抗劑BQ123阻斷，ETB受體拮抗劑BQ788對ET-1促SPC-A1細胞增殖作用無影響。 5．

5、ETA受體拮抗劑BQ123可以顯著降低sPC-Al細胞基礎(chǔ)生長率，ETB受體拮抗劑BQ788無此作用。 6．用EDTA(0.4 mmol/L)去除細胞外鈣離子及電壓依賴型Ca<'2+>通道阻滯劑nifedipine(1μmol/L)能抑制ET-1誘導(dǎo)的肺腺癌細胞增殖。 研究結(jié)果結(jié)果表明，人肺腺癌SPC-Al細胞可自分泌ET-1，ET-1通過ETA受體促SPC-A1細胞生長，細胞外Ca<'2+>通過電壓依賴型Ca<