人胰島素樣生長因子-Ⅰ基因在巴斯德畢赤酵母中的分泌表達.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩58頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、人的胰島素樣生長因子-Ⅰ是存在于人體多種組織中的具有多種重要生理功能的細胞因子。它的缺乏會導致多種嚴重的疾病。因而它也成為具有多種治療用途的藥物。本研究目的是利用畢赤酵母表達系統(tǒng)高效地表達這種蛋白。 本研究利用PCR引入突變的方法成功地改造胰島素樣生長因子-Ⅰ的基因序列以滿足畢赤酵母對密碼子的偏好性，以期提高其在畢赤酵母表達系統(tǒng)中的表達水平。成功地將改造過的人胰島素樣生長因子基因定向克隆到畢赤酵母表達載體上。把構建好的表達載體轉

2、入巴斯德畢赤酵母中，經歷組氨酸缺陷培養(yǎng)基的篩選和含有不同濃度G418的培養(yǎng)基的多次篩選，獲得9個能在含5.0mg/mlG418YPD培養(yǎng)基上生長克隆。PCR鑒定表明：胰島素樣生長因子Ⅰ基因已經成功地整合進入畢赤酵母GS115的基因組中。挑選其中的1個克隆在恒溫振蕩器實行誘導表達。分別在第48、72、96、120小時取上清，用硫酸銨沉淀蛋白。經過SDS-PAGE電泳顯示：表達的外源蛋白與目標蛋白大小一致。Westernbloting表明它

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論