人參皂甙Rg1促進(jìn)嗅鞘細(xì)胞遷移及修復(fù)脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分：人參皂甙Rg1對(duì)嗅鞘細(xì)胞遷移能力的影響
　　目的：探討人參皂甙Rg1對(duì)嗅鞘細(xì)胞（OECs）遷移能力及遷移相關(guān)因子基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）及神經(jīng)細(xì)胞黏附分子1（NCAM1）表達(dá)的影響。
　　方法：從新生3~5d的SD大鼠嗅球取材獲得嗅鞘細(xì)胞體外培養(yǎng)、純化后，進(jìn)行人參皂甙Rg1干預(yù)（40μg/ml濃度下干預(yù)72 h）并設(shè)置對(duì)照（加等量DMEM/F12培養(yǎng)基），通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)和Tr

2、answell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人參皂甙Rg1對(duì)嗅鞘細(xì)胞遷移能力的影響。反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）分別測(cè)定兩組細(xì)胞遷移相關(guān)因子MMP-2、MMP-9和NCAM1的mRNA表達(dá)。通過(guò)Western-blot研究Rg1對(duì)嗅鞘細(xì)胞PI3K/Akt通路的影響。
　　結(jié)果：Rg1組劃痕愈合面積明顯高于對(duì)照組(P<0.05)； Rg1組嗅鞘細(xì)胞穿過(guò)隔離膜的細(xì)胞數(shù)量較對(duì)照組明顯增多(P<0.05)；RT-PCR結(jié)果表明：人參皂甙Rg1顯著上

3、調(diào)嗅鞘細(xì)胞MMP-2、MMP-9和NCAM1的mRNA表達(dá)(P<0.05)。Rg1能夠促進(jìn)嗅鞘細(xì)胞PI3K/Akt通路的活化。
　　結(jié)論：人參皂甙Rg1通過(guò)上調(diào)嗅鞘細(xì)胞遷移相關(guān)因子MMP-2、MMP-9和NCAM1的表達(dá)，提高細(xì)胞的遷移能力，這一作用可能通過(guò)PI3K/Akt通路完成。
　　第二部分：人參皂甙Rg1促進(jìn)嗅鞘細(xì)胞修復(fù)脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：研究人參皂甙Rg1對(duì)嗅鞘細(xì)胞（olfactory enshea

4、thing cells, OECs）移植修復(fù)脊髓損傷能力的影響。
　　方法：新生SD大鼠嗅球組織體外培養(yǎng)、純化嗅鞘細(xì)胞，人參皂甙Rg1干預(yù)并設(shè)置對(duì)照，Allen打擊建立大鼠脊髓損傷模型，隨機(jī)分成三組，對(duì)照組（control）、嗅鞘細(xì)胞移植組（OECs組）和Rg1干預(yù)嗅鞘細(xì)胞移植組（Rg1+O ECs組），于移植后第1、3、7、14、28天分別進(jìn)行肢體活動(dòng)BBB評(píng)分，并于第28d取損傷部位脊髓組織制作石蠟切片進(jìn)行免疫組化檢測(cè)；RT-

5、PCR分別測(cè)定OECs組和Rg1+OECs組脊髓組織中CNTF和VEGF的mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：Rg1+OECs組后肢運(yùn)動(dòng)恢復(fù)情況優(yōu)于 OECs組和對(duì)照組，組織切片示Rg1+OECs組神經(jīng)元數(shù)量明顯高于OECs組和對(duì)照組（P<0.01），GFAP表達(dá)量顯著低于OECs組和對(duì)照組（P<0.01），HE染色示Rg1+OECs組脊髓組織結(jié)構(gòu)清晰，囊性病變及細(xì)胞水腫壞死數(shù)量明顯少于其它各組；RT-PCR結(jié)果顯示人參皂甙Rg1顯著上調(diào)嗅