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文檔簡介
1、第一部分:人參皂甙Rg1對嗅鞘細胞遷移能力的影響
目的:探討人參皂甙Rg1對嗅鞘細胞(OECs)遷移能力及遷移相關(guān)因子基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)及神經(jīng)細胞黏附分子1(NCAM1)表達的影響。
方法:從新生3~5d的SD大鼠嗅球取材獲得嗅鞘細胞體外培養(yǎng)、純化后,進行人參皂甙Rg1干預(40μg/ml濃度下干預72 h)并設置對照(加等量DMEM/F12培養(yǎng)基),通過劃痕實驗和Tr
2、answell小室實驗檢測人參皂甙Rg1對嗅鞘細胞遷移能力的影響。反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)分別測定兩組細胞遷移相關(guān)因子MMP-2、MMP-9和NCAM1的mRNA表達。通過Western-blot研究Rg1對嗅鞘細胞PI3K/Akt通路的影響。
結(jié)果:Rg1組劃痕愈合面積明顯高于對照組(P<0.05); Rg1組嗅鞘細胞穿過隔離膜的細胞數(shù)量較對照組明顯增多(P<0.05);RT-PCR結(jié)果表明:人參皂甙Rg1顯著上
3、調(diào)嗅鞘細胞MMP-2、MMP-9和NCAM1的mRNA表達(P<0.05)。Rg1能夠促進嗅鞘細胞PI3K/Akt通路的活化。
結(jié)論:人參皂甙Rg1通過上調(diào)嗅鞘細胞遷移相關(guān)因子MMP-2、MMP-9和NCAM1的表達,提高細胞的遷移能力,這一作用可能通過PI3K/Akt通路完成。
第二部分:人參皂甙Rg1促進嗅鞘細胞修復脊髓損傷的實驗研究
目的:研究人參皂甙Rg1對嗅鞘細胞(olfactory enshea
4、thing cells, OECs)移植修復脊髓損傷能力的影響。
方法:新生SD大鼠嗅球組織體外培養(yǎng)、純化嗅鞘細胞,人參皂甙Rg1干預并設置對照,Allen打擊建立大鼠脊髓損傷模型,隨機分成三組,對照組(control)、嗅鞘細胞移植組(OECs組)和Rg1干預嗅鞘細胞移植組(Rg1+O ECs組),于移植后第1、3、7、14、28天分別進行肢體活動BBB評分,并于第28d取損傷部位脊髓組織制作石蠟切片進行免疫組化檢測;RT-
5、PCR分別測定OECs組和Rg1+OECs組脊髓組織中CNTF和VEGF的mRNA表達。
結(jié)果:Rg1+OECs組后肢運動恢復情況優(yōu)于 OECs組和對照組,組織切片示Rg1+OECs組神經(jīng)元數(shù)量明顯高于OECs組和對照組(P<0.01),GFAP表達量顯著低于OECs組和對照組(P<0.01),HE染色示Rg1+OECs組脊髓組織結(jié)構(gòu)清晰,囊性病變及細胞水腫壞死數(shù)量明顯少于其它各組;RT-PCR結(jié)果顯示人參皂甙Rg1顯著上調(diào)嗅
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