2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、人促血液血管細胞生長因子(Hemangiopoietin，HAPO)是一個作用于早期造血細胞和內皮細胞系的細胞因子，能促進早期造血和血管細胞的黏附、增殖和趨化。 核仁素(Nucleolin)作為一個RNA結合蛋白主要存在于細胞核內，分子量為110kDa。后來研究發(fā)現(xiàn)nucleolin也存在于細胞質中及細胞膜上，其功能涉及轉運細胞因子及構成細胞信號傳導通路。 免疫共沉淀和免疫印記實驗發(fā)現(xiàn)EVC-304細胞中的nucleol

2、in能夠與HAPO特異性結合，這提示我們nucleolin可能成為HAPO的受體。因此，本實驗選擇人nucleolin基因、nucleolin N端肽以及nucleolinC端肽作為免疫原，采用三種免疫方案，應用雜交瘤技術，制備抗人nucleolin單克隆抗體。通過間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、westernblot分析、間接免疫熒光試驗、流式細胞術(FCM)、非競爭ELISA、ELISA相加試驗等鑒定抗體的特異性。 實驗

3、得到三株抗人nucIeolin N端肽單克隆抗體(分別命名為8G12、9E8、9E10)及抗人nucleolin C端肽多克隆抗體。實驗結果表明8G12、9E8、9E10識別同一抗原表位；8G12、9E8及抗人nucleolinC端肽多克隆抗體既可與ECV-304、U937細胞中變性的nucleolin蛋白特異性結合也能夠與ECV-304、U937細胞表面天然的nucleolin分子特異結合；且8G12可與HAPO競爭性結合U937細胞

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