青藤堿通過ROS誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致骨肉瘤凋亡并抑制骨肉瘤增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移.pdf

1、骨肉瘤是最常見的原發(fā)骨的惡性腫瘤.歸功于新輔助化療的實(shí)行及外科手術(shù)技術(shù)的提升，目前骨肉瘤的10年生存率到達(dá)65％。而然，近二十年來，骨肉瘤的治療鮮有有效的進(jìn)展。對于復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的骨肉瘤患者來說，他們的長期生存率仍讓人不能滿意。因此我們迫切的期望能找到一種新型、有效，具有潛在骨肉瘤治療意義的藥物。青藤堿，一種傳統(tǒng)治療關(guān)節(jié)炎的生物堿中藥提取物，被證明具有多種抗腫瘤、抑制腫瘤侵襲的活性。然而它對于骨肉瘤的治療療效及可能通過的分子機(jī)制，我們?nèi)匀徊?/p>

2、清楚。
　　在本次研究中，通過單細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期流式細(xì)胞儀檢測及周期相關(guān)蛋白檢測，我們發(fā)現(xiàn)青藤堿具有通過抑制骨肉瘤克隆形成能力、引起骨肉瘤細(xì)胞S期周期阻滯而發(fā)揮抑制骨肉瘤增殖的作用。我們的前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，青藤堿對骨肉瘤具有直接殺傷作用。高濃度青藤堿通過引起ROS大量活化從而誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞發(fā)生誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，最終導(dǎo)致骨肉瘤細(xì)胞的凋亡。那么青藤堿是否具有抑制骨肉瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的作用呢。通過劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)、明膠酶譜、

3、ELISA、蛋白電泳等豐富的實(shí)驗(yàn)手段，我們發(fā)現(xiàn)低濃度作用的青藤堿可以通過抑制CXCR4-STAT3軸調(diào)節(jié)下游MMP-2、MMP-9、RANKL、VEGF等信號靶點(diǎn)表達(dá)，從而抑制RANKL調(diào)控的破骨細(xì)胞異?；罨瘜?dǎo)致的骨溶解及VEGF誘導(dǎo)腫瘤新生血管形成，進(jìn)而發(fā)揮抑制骨肉瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的作用。上述大量體外實(shí)驗(yàn)為我們提供大量證據(jù)解釋了青藤堿對骨肉瘤可能的作用機(jī)制。更重要的是，在體內(nèi)動物實(shí)驗(yàn)中，通過建立骨肉瘤異位皮下模型及脛骨原位腫瘤模型，我們驗(yàn)