Glycoborinine誘導HepG2細胞凋亡的細胞信號途徑研究.pdf

1、五葉山小桔屬于蕓香科。在中國和印度傳統(tǒng)醫(yī)藥中，五葉山小桔被廣泛用于治療發(fā)燒、感冒、麻木和其他疾病?，F(xiàn)代臨床研究表明，五葉山小桔有保肝活性。但是，其活性的有效成分尚不清楚。Glycoborinine(GB)是從五葉山小桔中分離出來的主要生物堿之一，屬于咔唑生物堿。之前的研究發(fā)現(xiàn)：GB具有光敏抗菌和抗癌活性。但是，其抗癌活性的機制并不清楚。
　　本次研究的目的是探索GB抗癌的細胞信號途徑。以HepG2作為細胞模型，通過MTT實驗、Ho

2、chest33258染色實驗、PI染色實驗和Annexin V-FITC和PI染色實驗分析GB對HepG2細胞的存活率、細胞形態(tài)學、核染色質形態(tài)學、sub-G1和凋亡的影響。通過研究GB對HepG2的ROS水平和線粒體膜電位的影響，以及對Bax、Bcl-2、細胞質細胞色素C、caspase-3和PARP表達量的影響等，證實GB通過線粒體途徑誘導HepG2細胞凋亡。
　　MTT實驗顯示，GB抑制HepG2細胞增殖。在48 h，GB誘

3、導細胞死亡50％的抑制濃度為39.7μM。
　　Hochest33258的染色實驗表明，GB處理組細胞染色質發(fā)生凝聚。PI染色實驗結果表明，GB處理誘導HepG2細胞形成凋亡峰（sub-G1）。Annexin V-FITC和PI的染色結果表明，GB可以誘導HepG2凋亡。
　　進一步研究顯示，GB處理可誘導HepG2細胞的ROS水平增高。同時，GB處理可誘導 HepG2線粒體膜電位下降。免疫印跡研究結果顯示，GB可誘導 He