Podocin在缺血-再灌注大鼠腎臟足細(xì)胞中的表達(dá)及烏司他丁的干預(yù)作用.pdf

1、目的：探討腎缺血-再灌注對(duì)足細(xì)胞的損傷情況及足細(xì)胞相關(guān)蛋白Podocin的表達(dá)變化并觀察烏司他丁對(duì)足細(xì)胞的保護(hù)作用及對(duì)其相關(guān)蛋白的表達(dá)的影響,為臨床預(yù)防腎臟缺血。再灌注引發(fā)急性缺血性。腎功損傷等腎臟疾病提供理論基礎(chǔ)。 方法：78只雄性SD大鼠隨機(jī)分為三大組：對(duì)照組(c)36只,模型組(M)即腎臟單純?nèi)毖M(I)與缺血.再灌注模型組(I/R)共36只,和烏司他丁組(U)6只。M和U組大鼠夾閉雙側(cè)腎動(dòng)脈60min后重新開放腎臟血供,

2、制作腎臟I/R模型,C組不夾閉雙側(cè)腎動(dòng)脈。U組缺血前30min及再灌注開始時(shí)尾靜脈注射烏司他丁1萬(wàn)單位,C和M組分別注射生理鹽水1ml。C和M組于再灌注后0min(缺血組)、30、60min、3、12、24h分別開腹留取腎組織,U組于再灌注60min時(shí)留取組織,應(yīng)用電鏡觀察C、I、I/R60min、24h、U組足細(xì)胞形態(tài)變化,免疫組化及RT-PCR觀察各組足細(xì)胞相關(guān)蛋白podocin的分布及mRNA表達(dá)量的變化。 結(jié)果：(1)透

3、射電鏡顯示:Ⅰ組損傷較輕,僅見足細(xì)胞腫脹,輕微融合；I/R60min組足細(xì)胞足突廣泛融合、消失；I/R24h組基本恢復(fù)正常,僅少數(shù)部分區(qū)域有足突融合。U組足細(xì)胞足突增寬程度不明顯,未見足細(xì)胞足突缺失。C組腎小球足細(xì)胞足突排列正常。(2)免疫組化顯示:C組podocin染色呈現(xiàn)沿腎小球毛細(xì)血管粗線樣分布,I和I/R30min組podocin呈現(xiàn)除不連續(xù)粗線樣分布外局部呈粗顆粒狀；I/R60min、3h組呈不連續(xù)細(xì)線狀分布；12h組呈粗大顆

4、粒狀；24h分布呈粗細(xì)交替線狀分布；U組podocin染色為細(xì)線狀分布。(3)RT-PCR半定量顯示：與C相比,I/R30、60min和3h組podocin mRNA表達(dá)顯著上調(diào)(p<0.05);12h、24h組恢復(fù)正常；各缺血-再灌注組分別與單純?nèi)毖M比較,30、60min組podocin mRNA表達(dá)顯著上調(diào)(p<0.05);U組podocin mRNA表達(dá)同C組無(wú)明顯差別。 結(jié)論：腎缺血-再灌注能引起足細(xì)胞的損傷,在此過程