LDLR基因與寧夏地區(qū)HTG的相關(guān)性研究及FH家系永生細(xì)胞株的建立.pdf

1、低密度脂蛋白受體(LDLR)是一種細(xì)胞膜表面糖蛋白，其既可與低密度脂蛋白(LDL)結(jié)合，又可與極低密度脂蛋白(VLDL)結(jié)合，對機(jī)體的脂蛋白代謝起著重要作用，與臨床上高甘油三酯血癥(HTG)等疾病密切相關(guān)。近年調(diào)查結(jié)果表明，HTG在寧夏地區(qū)群體的血脂紊亂中最為常見。因此，開展寧夏地區(qū)回漢族人群中高甘油三酯血癥的研究，不僅對提高該地區(qū)居民的健康水平具有重要意義，而且也將在進(jìn)一步明確HTG的發(fā)生機(jī)理、預(yù)測疾病的轉(zhuǎn)歸等方面具有重要的作用。

2、r>　　 LDLR是在研究家族性高膽固醇血癥(FH)的發(fā)病機(jī)制時發(fā)現(xiàn)的，LDLR突變可導(dǎo)致FH。FH是一種常染色體顯性遺傳病，該疾病可引起不同程度的高膽固醇血癥和早期冠心病等，是目前醫(yī)學(xué)和分子遺傳學(xué)研究領(lǐng)域的熱點之一。由于FH起病早，死亡率高。因此，建立FH家系永生細(xì)胞株，以永久保存該疾病的遺傳資源，對于今后進(jìn)一步研究該病發(fā)病機(jī)制和建立治療方案則顯得尤為重要。
　　 本研究采用的方法及所得結(jié)果如下：
　　 1.采用聚合

3、酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)合限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)的方法，對216名寧夏回漢族健康個體、212名回漢族HTG患者的4個LDLR多態(tài)性位點(內(nèi)含子15的PvuⅡ位點、內(nèi)含子4的TaqI位點、外顯子的13 AvaⅡ位點、外顯子18的NcoI位點)的基因型頻率、等位基因頻率和單倍型進(jìn)行了分析。結(jié)果表明：上述4個多態(tài)性位點在寧夏地區(qū)回、漢族間存在顯著差異，表明這兩個民族的遺傳存在一定的差異；后3個位點在不同民族的健康人群與高甘油三酯血癥患者

4、之間均存在顯著差異，表明LDLR是寧夏地區(qū)HTG的易感基因；單倍型ApTN、aPtn分別在寧夏回、漢族HTG患者中作為危險因素的可能性極大。
　　 2.利用EBV加環(huán)孢素(CyA)處理法，對FH家系9名成員(8名為患者)的外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行了轉(zhuǎn)化，獲得了穩(wěn)定的FH家系永生細(xì)胞株。對外周血及轉(zhuǎn)化后細(xì)胞株gDNA13外顯子含AvaⅡ位點片段的PCR-RFLP檢測結(jié)果表明，建株前后該片段大小未發(fā)生變化。對家系Ⅱ-1成員含AvaⅡ位點片