Pelo條件性基因敲除胚胎干細胞株的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Pelo基因在精子發(fā)生、細胞周期、減數(shù)分裂以及mRNA降解中有重要的功能，但具體機制還并不是非常清楚。Pelo敲除的小鼠是胚胎致死的，酵母中Pelo的同源物Dom34敲除的酵母孢子生成也明顯的受到影響，果蠅同源基因pelota突變導(dǎo)致果蠅的精子和卵子發(fā)生的缺陷，這些表型揭示Pelo可能調(diào)控發(fā)育過程中細胞的有絲分裂，但沒有直接證據(jù)，具體機制也不明確。
　　 組織特異性的基因條件性敲除技術(shù)使目的基因的敲除在區(qū)域上可人為控制，避免了死

2、胎或動物出生后不久即死亡等現(xiàn)象的出現(xiàn)。該技術(shù)一般以Cre/LoxP系統(tǒng)為基礎(chǔ)，Cre重組酶在特定的細胞類型中表達，介導(dǎo)相應(yīng)細胞中兩個Loxp修飾位點間基因的敲除。Pelo基因條件性敲除小鼠將為人們研究該基因提供了一個很好的平臺與動物模型。
　　 本論文采用經(jīng)典的同源重組方法建立小鼠Pelo基因條件性敲除胚胎干細胞。在構(gòu)建條件性敲除載體時，選擇新霉素抗性基因Neo作為正篩選標記，白喉毒素基因DT為負篩選標記。敲除載體基因的兩端各插

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