新生牛腦活性肽NBBP-1誘導(dǎo)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-SH細(xì)胞凋亡作用與機(jī)理研究.pdf

1、采用酸抽提、離子交換、凝膠柱層析等方法，從新生小公牛腦內(nèi)分離提取到新生牛腦活性肽NBBP-1，處理人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-SH細(xì)胞，觀察鑒定NBBP-1對人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)，并初步探索其對神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-H細(xì)胞的作用機(jī)理。 實驗結(jié)果表明，NBBP-1能有效抑制SK-N-SH細(xì)胞增殖活動，其細(xì)胞生長抑制率達(dá)88.84％。流式細(xì)胞儀檢測SK-N-SH細(xì)胞經(jīng)NBBP-1處理后，亞G1期細(xì)胞增多，出現(xiàn)G0/G1期阻滯

2、；DNA電泳實驗顯示DNA降解成小片段，細(xì)胞進(jìn)入凋亡。光鏡、電鏡觀察顯示經(jīng)處理后的SK-N-SH細(xì)胞趨于固縮狀態(tài)，細(xì)胞體積減小，核膜崩解，細(xì)胞核出現(xiàn)斷裂現(xiàn)象形成核殘體，異染色質(zhì)增多且多為凝聚狀態(tài)，細(xì)胞質(zhì)空泡化明顯，出現(xiàn)凋亡小體等典型的細(xì)胞凋亡形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)特征。免疫細(xì)胞化學(xué)觀察顯示，NBBP-1處理后的SK-N-SH細(xì)胞，與細(xì)胞凋亡相關(guān)的癌基因bcl-2表達(dá)下調(diào)，抑癌基因p53、fas、bax等表達(dá)上調(diào)。 研究結(jié)果表明，新生牛