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1、將漆酶保守序列引物擴(kuò)增法與長距離反向PCR(LD-IPCR)技術(shù)相結(jié)合,建立了真菌漆酶基因的新型克隆體系,從栓菌AH28-2(Trametessp.AH28-2)中克隆得到三個漆酶同工酶基因(lacA、lacB和lacC)和一個漆酶假基因lcD。這些同工酶基因與其它擔(dān)子菌漆酶在氨基酸水平上呈現(xiàn)出很高的相似性。lacA、lacB和lacC的5′-非編碼區(qū)均存在多個可能的順式作用元件一致序列,包括TATAbox、CAATbox、MRE、XR
2、E和CreA結(jié)合位點(diǎn),這三個基因5′-非編碼區(qū)的平均G+C含量分別為59％、60％和52％。lacA和lacB的TATAbox位于起始密碼子上游約-100bp處,與其不同,lacC的TATAbox位于-172bp。Cu~(2+)的存在對于Trametessp.AH28-2漆酶同工酶基因的表達(dá)是必需的,并且Cu~(2+)濃度的不同對同工酶的誘導(dǎo)效應(yīng)不同,低濃度的Cu~(2+)(<0.5mmol/L)能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生LacA和一新型漆酶,而高濃
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