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文檔簡介
1、本研究以制備汞的多克隆抗體為目的,將牛血清白蛋白(BSA)與汞離子通過谷胱甘肽偶聯(lián),合成了完全抗原Hg-GSH-BSA,將卵黃原蛋白(OVA)與汞離子通過青霉素G鈉鹽偶聯(lián),合成了完全抗原Hg-青霉素-OVA。以Hg-GSH-BSA作為免疫原,免疫新西蘭大白兔一段時間后,采取動物的血清,用Hg-青霉素-OVA作為包被原,包被酶標(biāo)板,采用間接ELISA法測定血清效價并對其進行鑒定,結(jié)果表明:采集到的血清中含有針對汞的抗體,血清效價為1:20
2、4800。在獲得抗體的基礎(chǔ)上,對運用抗體建立間接競爭ELIsA檢測的方法進行了初步探索,考察了ELISA檢測方法的其中五個影響因子,確定的最佳檢測條件為:包被抗原500倍稀釋,抗血清12000倍稀釋,3%脫脂奶粉作為封閉劑,酶標(biāo)二抗3000倍稀釋,0.5mmol/L EDTA為螯合劑。以抑制率I為縱坐標(biāo),Hg2+濃度對數(shù)(lgC)為橫坐標(biāo),建立檢測曲線,得到線性回歸方程為:Y=0.1874X-0.0499,相關(guān)系數(shù)為0.9739,其中Y
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