植物基因功能分析高通量雙元載體.pdf

1、Invitrogen公司利用λ噬菌體點特性重組系統(tǒng)建立的GatewayTM重組克隆技術(shù)極大的方便了目的基因的高通量的克隆。目的基因首先穿梭到入門載體中,然后根據(jù)各種模式生物研究的需要重組到的各種目的載體中去。由于其高通量的高效克隆的特點,許多實驗室構(gòu)建了很多可以用來研究啟動子分析,蛋白質(zhì)定位,蛋白與蛋白相互作用,組成型以及可誘導(dǎo)性表達(dá)。為了滿足高等植物功能基因研究的需要,我們構(gòu)建了一系列高通量的可以用米進(jìn)行農(nóng)桿菌介導(dǎo)植物轉(zhuǎn)化的雙元載體。

2、這些載體不僅具有高通量的特點,同時通過引入特異的多克隆位點,可以非常方便的進(jìn)行啟動子的替換。因此這系列載體能夠根據(jù)研究的需要實現(xiàn)目的基因的組成型、組織特異性及誘導(dǎo)性等可調(diào)控化表達(dá),啟動子的分析,也可以通過GFP融合實現(xiàn)對蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位的研究以及實現(xiàn)目的基因的組成型、組織特異性及誘導(dǎo)性RNAi敲除。
　　本文首先介紹了植物轉(zhuǎn)基因所使用的雙元載體相關(guān)內(nèi)容,同時介紹了目前所發(fā)展的采用GatewayTM重組克隆技術(shù)建立起來的植物雙元載體