高糖H9c2運(yùn)用七氟醚后處理時(shí)HIF-1α對(duì)mPTP通道調(diào)節(jié)機(jī)制的研究.pdf

1、目的：探討高糖狀態(tài)心肌細(xì)胞低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）對(duì)線粒體膜通透性轉(zhuǎn)化孔（mPTP）的調(diào)節(jié)機(jī)制，并揭示高糖狀態(tài)下心肌缺血再灌注損傷加重的關(guān)鍵分子靶點(diǎn)。
　　方法：運(yùn)用H9c2心肌細(xì)胞系建立缺氧復(fù)氧損傷模型，采用試劑盒檢測(cè)乳酸脫氫酶（LDH）及CCK-8水平；TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡；通過(guò)激光共聚焦檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜通透性轉(zhuǎn)化孔及線粒體膜電位改變；通過(guò)Western blot法檢測(cè)HIF-1α及己糖激酶（HKII）的表達(dá)；免疫

2、熒光法檢測(cè)HKII含量及其分布。
　　結(jié)果：
　　1）與正常組相比較，缺氧復(fù)氧損傷及七氟醚后處理均可上調(diào)HIF-1α蛋白表達(dá)，其中七氟醚上調(diào)更為顯著，HIF-1α可抑制mPTP開(kāi)放，減少細(xì)胞凋亡；
　　2）抑制HIF-1α其下游靶基因HKII表達(dá)受到明顯抑制，mPTP通道開(kāi)放增加，細(xì)胞損傷明顯；
　　3）抑制HKII后，HIF-1α喪失對(duì)mPTP的調(diào)節(jié)，七氟醚后處理失去其心肌保護(hù)作用；
　　4）在高糖狀態(tài)下

3、，運(yùn)用七氟醚后處理，并未減少心肌細(xì)胞凋亡。其HIF-1α及HKII的表達(dá)較正常七氟醚處理組無(wú)明顯差異，但HKII存在向細(xì)胞膜聚集現(xiàn)象。
　　結(jié)論：在缺氧復(fù)氧損傷中七氟醚后處理可上調(diào)HIF-1α蛋白表達(dá)，產(chǎn)生心肌保護(hù)作用。其機(jī)制可能是上調(diào)HIF-1α能夠激活其下游靶基因HKII，抑制mPTP通道的開(kāi)放，從而減輕缺氧復(fù)氧造成的心肌細(xì)胞損傷。高糖狀態(tài)下七氟醚保護(hù)作用減弱或消失的原因可能是由于HKII發(fā)生轉(zhuǎn)位導(dǎo)致HIF-1α失去了對(duì)mPT