慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥的機制研究.pdf

1、第一部分慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進患者脾部分栓塞后并發(fā)癥與腸道菌群相關(guān)性研究
　　目的:探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與腸道菌群的相關(guān)性。
　　方法:本組研究對象分為四組：正常組；肝硬化合并脾功能亢進脾部分栓塞術(shù)前組；肝硬化合并脾功能亢進脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組；肝硬化合并脾功能亢進脾部分栓塞術(shù)后沒有并發(fā)癥組。收集各組研究對象的糞便標(biāo)本進行細菌培養(yǎng)并計數(shù)；采用實時熒光定量P

2、CR的方法來比較各組人群腸道主要菌群(乳酸桿菌、雙歧桿菌、擬桿菌、腸桿菌、腸球菌及梭菌)的變化。
　　結(jié)果:本研究在培養(yǎng)的10種腸道主要細菌中，3組實驗組與正常對照組比較，腸桿菌、腸球菌、葡菌球菌、酵母菌數(shù)量顯著增多，擬桿菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量顯著減少。而在脾栓塞術(shù)術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥患者中，腸桿菌和腸球菌的數(shù)量較術(shù)前組及術(shù)后沒有并發(fā)癥組明顯增多，雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量顯著減少。Real-time PCR的檢測結(jié)果提示：與正常人

3、群比較，3組實驗組患者的腸桿菌、腸球菌和梭菌明顯增加，擬桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量顯著減少；各組間乳酸桿菌的數(shù)量沒有明顯差異。而術(shù)后有并發(fā)癥組中腸桿菌、腸球菌和梭菌的數(shù)量較術(shù)前組及術(shù)后沒有并發(fā)癥組明顯增多，雙歧桿菌的數(shù)量顯著減少。Real-time PCR的檢測結(jié)果與細菌培養(yǎng)結(jié)果基本一致。
　　結(jié)論:慢性乙型病毒性肝炎肝硬化脾功能亢進脾部分栓塞患者存在腸道微生態(tài)失衡,特別是術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥的患者，菌群失調(diào)更明顯。
　　第二部分慢性乙

4、型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥與炎癥因子及內(nèi)毒素的相關(guān)性研究
　　目的:探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與與炎癥因子及內(nèi)毒素的相關(guān)性。
　　方法:將研究對象分為三組：正常組；肝硬化合并脾功能亢進脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組；肝硬化合并脾功能亢進脾部分栓塞術(shù)后沒有并發(fā)癥組。在術(shù)前1天、術(shù)后7天及術(shù)后1個月抽取患者外周靜脈血液，采用ELISA法檢測LPS、IL-6、IL

5、-8、TNF-α及sICAM-1的表達。
　　結(jié)果:行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后有并發(fā)癥的患者組，外周血中LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及sICAM-1含量一直高于正常組，且術(shù)后第7天水平明顯高于術(shù)前水平，而術(shù)后1個月時與術(shù)前水平無明顯差異。行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后沒有并發(fā)癥的患者組，外周血中LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及sICAM-1含量一直高于正常組，但術(shù)后7天及術(shù)后1個月時LPS、IL-6、IL-8及TNF-α含量與術(shù)前水

6、平無明顯差異，而sICAM-1含量在術(shù)后7天時明顯高于術(shù)前。術(shù)后有并發(fā)癥組的LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及sICAM-1含量在術(shù)后7天時明顯高于術(shù)后沒有并發(fā)癥組，而在術(shù)后1個月時兩組沒有明顯差異。
　　結(jié)論:術(shù)后一周LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及sICAM-1仍持續(xù)增高可以作為脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與否的參考指標(biāo)。
　　第三部分慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥與免疫功能相關(guān)

7、性研究
　　目的:探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進患者脾部分栓塞術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥與免疫功能的相關(guān)性。
　　方法:將研究對象分為三組：正常組；肝硬化合并脾功能亢進脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組；肝硬化合并脾功能亢進脾部分栓塞術(shù)后沒有并發(fā)癥組。采用流式細胞術(shù)檢測患者術(shù)前、術(shù)后1個月、術(shù)后6個月、術(shù)后1年及術(shù)后2年的外周血中CD3+、CD4+、CD8+T細胞及CD4+CD25+CDl27low/-Treg的表達變化，采用全自動免

8、疫分析儀測定免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）的含量。
　　結(jié)果:流式細胞儀檢測結(jié)果顯示行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后有并發(fā)癥的患者組，外周血中CD3+和CD8+T細胞的量開始低于正常水平，后期逐漸恢復(fù)正常水平，但CD4+T細胞的含量均低于正常人群。與術(shù)前相比，術(shù)后CD3+、CD4+和CD8+T細胞含量先降低后升高至正常水平。行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后沒有并發(fā)癥的患者組，外周血中CD3+、CD4+T和CD8+T細胞水平術(shù)后早期低于正常水平，后來逐漸

9、恢復(fù)正常水平。與術(shù)前相比，術(shù)后CD3+、CD4+ T細胞含量先降低后升高至正常水平，而CD8+ T細胞與術(shù)前水平比較無明顯差異。術(shù)后有并發(fā)癥組的CD3+、CD4+和CD8+T細胞含量在術(shù)后早期明顯低于術(shù)后沒有并發(fā)癥組，后期兩組間無明顯差異。各組患者中CD4+CD25+CDl27low/-Treg含量在術(shù)后1個月或6個月時較正常組及術(shù)前水平明顯增高，隨后會逐漸恢復(fù)至正常水平。術(shù)后有并發(fā)癥組的CD4+CD25+CDl27low/-Treg含

10、量在術(shù)后1個月和6個月時明顯高于術(shù)后沒有并發(fā)癥組的CD4+CD25+CDl27low/-Treg含量，隨后各時間點兩者之間無明顯差異。免疫球蛋白檢測結(jié)果顯示各組患者在術(shù)前及術(shù)后各時間段的IgA、IgG、IgM含量與正常水平?jīng)]有明顯差異，各組間也沒有明顯差異。
　　結(jié)論:慢性乙型病毒性肝炎肝硬化脾亢患者行部分脾栓塞術(shù)對機體免疫功能只是產(chǎn)生短期的影響,特別在有并發(fā)癥的患者中早期影響更明顯，但后期患者的免疫功能會逐漸恢復(fù)正常，該結(jié)果提示