侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、目的：收集2009～2017年期間，中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院無菌體液標(biāo)本分離培養(yǎng)的非重復(fù)侵襲性肺炎鏈球菌52株，分析侵襲性肺炎鏈球菌對16種抗菌藥物的藥敏結(jié)果，明確侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥性，判斷侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥表型，檢測侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥基因，以明確侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥分子機(jī)制。
　　方法：采用VITEK2全自動微生物分析系統(tǒng)進(jìn)行侵襲性肺炎

2、鏈球菌菌種鑒定和藥物敏感性檢測，采用E-test法確認(rèn)青霉素MIC值≥2的侵襲性肺炎鏈球菌的藥敏結(jié)果，通過紅霉素和克林霉素的藥敏結(jié)果判斷侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥表型，采用PCR法檢測侵襲性肺炎鏈球菌核糖體甲基化酶ermB基因和外排泵蛋白的mefA基因和mefE基因，應(yīng)用核酸測序和Blast基因序列比對確認(rèn)目的基因。
　　結(jié)果：52株侵襲性肺炎鏈球菌對紅霉素耐藥非常嚴(yán)重，耐藥率達(dá)100％，大部分菌株對四環(huán)素和復(fù)方新

3、諾明表現(xiàn)為高水平耐藥，耐藥率分別為86.5％和61.5％，部分菌株對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物表現(xiàn)為低水平耐藥:阿莫西林的耐藥率為17.5％，美洛培南的耐藥率為13.5％，頭孢曲松的耐藥率為3.9％，頭孢噻肟的耐藥率為1.9％，青霉素的耐藥率為1.9％。未發(fā)現(xiàn)對厄他培南、左氧氟沙星、莫西沙星、氧氟沙星、利奈唑胺和萬古霉素耐藥的菌株。52株侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類藥物的耐藥表型全部表現(xiàn)為組成型耐藥（cMLSB型）。大環(huán)內(nèi)酯類藥物耐藥基因中，

4、核糖體甲基化酶ermB基因的檢出率為100％，外排泵蛋白mefA基因的檢出率為57.7％，外排泵蛋白mefE基因的檢出率為32.7％。其中，30.8％的侵襲性肺炎鏈球菌同時攜帶ermB、mefA和mefE三種耐藥基因，另外，尚有26.9％的侵襲性肺炎鏈球菌同時攜帶ermB和mefA兩種耐藥基因，1.9％的侵襲性肺炎鏈球菌同時攜帶ermB和mefE兩種耐藥基因，40.4％的侵襲性肺炎鏈球菌僅攜帶ermB耐藥基因。
　　結(jié)論：本地區(qū)侵

5、襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥情況十分嚴(yán)重。全部受試菌對紅霉素高水平耐藥，對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥表型均為組成型耐藥（即對大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類和鏈陽菌素類協(xié)同耐藥）。大環(huán)內(nèi)酯類藥物耐藥的侵襲性肺炎鏈球菌主要攜帶三種耐藥基因，即核糖體甲基化酶ermB基因（檢出率為100％），外排泵蛋白mefA基因（檢出率為57.7％）和mefE基因（檢出率為32.7％）。介導(dǎo)大環(huán)內(nèi)酯類藥物耐藥的基因即可單獨(dú)存在于侵襲性肺炎鏈球菌，也可以聯(lián)合

6、方式介導(dǎo)耐藥，其中，有40.4％的侵襲性肺炎鏈球菌僅攜帶ermB基因，仍表現(xiàn)出高水平耐藥，提示ermB基因是介導(dǎo)侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物高水平耐藥的重要機(jī)制，另有59.6％的侵襲性肺炎鏈球菌同時攜帶ermB基因與外排泵蛋白編碼基因相聯(lián)合的兩種或兩種以上耐藥基因，提示本地區(qū)侵襲性肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥機(jī)制以攜帶核糖體甲基化酶ermB基因為主，ermB基因聯(lián)合外排泵蛋白mefA或mefE基因的聯(lián)合介導(dǎo)耐藥方式更為多