葛根素抑制SLE外周血淋巴細胞P-gp表達以及對糖皮質激素干預效應的影響.pdf

1、目的：探討葛根素對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus,SLE）患者外周淋巴細胞P-gp的干預作用以及對糖皮質激素干預效應的影響，為提高SLE臨床療效提供新思路和新方法。
　　方法：1.利用淋巴細胞分離液分離培養(yǎng)健康志愿者外周血淋巴細胞，用小劑量甲基強的松龍（2μg/ml）誘導其耐藥，流式細胞術檢測細胞 P-gp表達、羅丹明-123（R-123）在細胞中的積累，并分析其與甲基強的松龍誘導的細胞凋

2、亡率、CD69抑制率的相關性。2.以四唑鹽比色法（MTT）篩選葛根素和維拉帕米對淋巴細胞的非細胞毒濃度。淋巴細胞分離液分離培養(yǎng)SLE患者外周血淋巴細胞，用含有葛根素的培養(yǎng)液孵育，以維拉帕米作為陽性對照組，流式細胞術檢測葛根素對SLE患者淋巴細胞P-gp表達、R-123積累的影響。3.用植物凝集素 PHA活化淋巴細胞，并用流式細胞術檢測葛根素與大劑量甲基強的松龍（200μg/ml）聯(lián)合干預對細胞AnnexinⅤ（％）和CD69熒光強度的影

3、響。
　　結果：1.小劑量甲基強的松龍(2μg/ml)誘導可使淋巴細胞P-gp表達、R-123積累率顯著增高，誘導的淋巴細胞在大劑量甲基強的松龍(200μg/ml)的干預下，表現(xiàn)出抑制細胞活化（CD69熒光強度）與誘導細胞凋亡效應低下，該作用與錯誤!鏈接無效。呈負相關、與R-123積累率呈正相關；2.葛根素干預72小時可顯著下調(diào)SLE患者外周血淋巴細胞P-gp表達，增加R-123在細胞中的積累，維拉帕米可顯著增加細胞中R-123的

4、積累，但對P-gp表達無顯著影響；3.葛根素干預可顯著增強甲基強的松龍誘導淋巴細胞凋亡和抑制CD69的效應。
　　結論：P-gp的高表達可顯著降低甲基強的松龍誘導淋巴細胞凋亡效應和抑制淋巴細胞活化作用；葛根素可顯著下調(diào)SLE外周血淋巴細胞P-gp表達和轉運活性，增強甲基強的松龍誘導淋巴細胞凋亡和抑制淋巴細胞活化作用。研究結果提示葛根素能在一定程度上逆轉SLE患者P-gp介導的激素耐藥，提高激素治療的敏感性。其作用機理可能是下調(diào)P-