甘露糖結(jié)合凝集素在1型糖尿病腎病早期診斷中的價(jià)值.pdf

1、目的：通過(guò)檢測(cè)1型糖尿病(type1 diabetes mellitus，T1DM)患者中伴有糖尿病腎病(diabetic kidney disease，DKD)和伴持續(xù)性正常白蛋白尿(persistentnormoalbuminuria，PN)兩組患者中血清甘露糖結(jié)合凝集素(mannose-bindinglectin，MBL)的水平，探討甘露糖結(jié)合凝集素與1型糖尿病腎病的關(guān)系及甘露糖結(jié)合凝集素在1型糖尿病腎病早期診斷中的價(jià)值。

2、　　方法：(1)研究對(duì)象:以伴或不伴糖尿病腎病的1型糖尿病患者為研究對(duì)象。我們隨機(jī)選擇2014年4月至2015年6月在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院和臨沂市人民醫(yī)院（山東大學(xué)教學(xué)醫(yī)院）腎內(nèi)科、內(nèi)分泌科住院治療的1型糖尿病患者448例。根據(jù)尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate，UAER)分為兩組，糖尿病腎病(DKD)組[UAER(30～300) mg/24h]和持續(xù)性正常白蛋白尿(PN)組(UAER＜30mg/2

3、4h)，兩組患者例數(shù)均為224例。兩組患者在性別、年齡、糖尿病病程方面均相匹配。
　　(2)診斷標(biāo)準(zhǔn):糖尿病診斷參照美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)(ADA)2010年提出的糖尿病診斷和分類標(biāo)準(zhǔn):(1)糖化血紅蛋白(HbA1c)≥6.5％;或(2)空腹血糖(FPG)≥7.0mmol/L(126mg/dl);或(3)口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)餐后2h血糖≥11.1mmol/L(200mg/dl);或(4)表現(xiàn)高血糖的典型癥狀或高血糖危象，隨機(jī)血糖

4、≥11.1mmol/L(200mg/dl)。滿足其一即可確診，如無(wú)明確的高血糖癥狀，1-3項(xiàng)需重復(fù)檢測(cè)確認(rèn)。
　　糖尿病腎病診斷參照2012年國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)糖尿病診療指南:以24小時(shí)尿白蛋白排泄率(UAER)作為診斷指標(biāo)。正常白蛋白尿，UAER＜30mg/24h;微量白蛋白尿，UAER(30～300) mg/24h;大量自蛋白尿，UAER＞300mg/24h。6個(gè)月內(nèi)連續(xù)測(cè)3次，滿足兩次結(jié)果陽(yáng)性即可。
　　本實(shí)驗(yàn)收

5、集連續(xù)性24小時(shí)尿液進(jìn)行UAER測(cè)定，共做3次，至少有2次UAER(30～300) mg/24h，存在視網(wǎng)膜病變，并沒(méi)有其他腎臟或尿路疾病的證據(jù)，即可診斷糖尿病腎病。
　　(3)檢測(cè)方法:所有的檢查都是在早晨進(jìn)行。所有參與試驗(yàn)的患者夜間禁食，早晨空腹從前臂快速抽取靜脈血。取血后1小時(shí)內(nèi)將凝固的血液進(jìn)行離心，采取血清儲(chǔ)存在-80℃冰箱中待檢。用高效液相色譜法檢測(cè)糖化血紅蛋白(HbA1c)(HLC723G7,日本TOSOH公司)，正常

6、范圍為4％～6％。收集24小時(shí)尿液，用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定尿白蛋白排泄率(UAER)（靈敏度，0.001毫克/升）。甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)采用時(shí)間-分辨免疫熒光分析方法對(duì)血清樣品進(jìn)行測(cè)定。將稀釋的患者血清加入包被銪標(biāo)記的抗MBL抗體的微孔中，放入恒溫箱孵育，然后用時(shí)間-分辨熒光儀（鮑曼生物科技有限公司，上海）對(duì)銪進(jìn)行定量測(cè)定，計(jì)算MBL濃度，最低檢測(cè)濃度為1.5μg/L。其他的生物標(biāo)志物如高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)和肌酐等則用標(biāo)準(zhǔn)

7、的實(shí)驗(yàn)室測(cè)試方法用生化分析儀進(jìn)行測(cè)定。
　　(4)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分類變量資料的結(jié)果用百分位數(shù)表示，連續(xù)性變量資料的結(jié)果用中位數(shù)（或四分位數(shù)間距，interquartile ranges，IQRs）表示。人口統(tǒng)計(jì)學(xué)和臨床特征的單變量數(shù)據(jù)資料采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)或卡方(χ2)檢驗(yàn)進(jìn)行分析。連續(xù)性資料變量間的相關(guān)性采用Spearman等級(jí)/秩相關(guān)系數(shù)進(jìn)行相關(guān)分析。采用不同的統(tǒng)計(jì)方法分析甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)是否對(duì)糖尿病腎

8、病(DKD)有預(yù)測(cè)價(jià)值:①采用Logistic回歸模型分析MBL與DKD的關(guān)系。在多因素分析中，我們納入了混雜因素、已知的危險(xiǎn)因素以及已用單因素分析評(píng)估過(guò)的其他因素，結(jié)果用校正后的優(yōu)勢(shì)比/比值比(odds ratios，OR)和與之相應(yīng)的95％可信區(qū)間(Confidence interval，CI)表示。②采用受試者工作特征(receiveroperating characteristic，ROC)曲線評(píng)價(jià)MBL的總體預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性，結(jié)果以

9、曲線下面積(area under curve，AUC)表示。所有統(tǒng)計(jì)分析均采用SPSS for Windows20.0進(jìn)行。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：與PN組比較，DKD組的HbA1c、SCr、UAER、hs-CRP、MBL均顯著高于PN組(P＜0.001)，DKD組的總膽固醇(TC)也高于PN組(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與PN組患者相比，DKD組患者血清MBL水平明顯高于PN組，濃度分別為2231(

10、IQR,1542-3110)μg/L和1100(IQR,856-1550)μg/L,P＜0.0001。糖化血紅蛋白(HbA1c)越高，血清MBL濃度越高，MBL水平和HbA1c水平呈正相關(guān)(r=0.348,P＜0.0001)。同樣，尿白蛋白排泄率(UAER)越高，血清MBL水平越高，MBL濃度和UAER呈正相關(guān)(r=0.285,P＜0.0001)。此外，在2組患者中，MBL濃度與超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)呈弱正相關(guān)(r=0.224,

11、P=0.002)。性別、年齡、肌酐、糖尿病病程、每日胰島素劑量與MBL均無(wú)顯著相關(guān)性。
　　以DKD為因變量，以各臨床指標(biāo)為自變量進(jìn)行Logistic回歸分析。在單變量分析中，MBL與DKD密切相關(guān)，OR值為1.002(95％CI:1.001-1.002,P＜0.0001)。在多變量分析中，調(diào)整所有其他的有意義的預(yù)測(cè)因子后，MBL仍然可被看作一個(gè)獨(dú)立的DKD的預(yù)測(cè)因子，調(diào)整后的OR值為1.001(95％ CI:1.001-1.00

12、2,P＜0.0001)。此外，男性、HbA1c、hs-CRP、肌酐和收縮壓也可以看作是DKD的預(yù)測(cè)指標(biāo)。
　　基于受試者工作特征(ROC)曲線，MBL作為診斷DKD的指標(biāo)，其最佳臨界值(the optimal cutoff value)為1680μg/L。以此值預(yù)測(cè)DKD時(shí)，敏感性為75.4％，特異性為78.8％，曲線下面積(area under curve，AUC)為0.768(95％CI:0.724-0.815)。此外，在Lo

13、gistic回歸分析中，以MBL≥1680μg/L作為一個(gè)自變量，進(jìn)行單變量分析時(shí)，其OR指為10.20，95％可信區(qū)間為4.06-30.12;在多變量分析中，調(diào)整可能的混雜因素后，MBL水平≥1680μg/L的OR為6.99(95％CI:2.83-17.15; P＜0.0001)。
　　結(jié)論：(1)血清甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)水平在1型糖尿病腎病患者中升高，并且與尿白蛋白排泄率(UAER)、糖化血紅蛋白(HbA1c)和hs-C