單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂對大鼠體外循環(huán)腦損傷及ERK1-2信號通路的影響.pdf

1、目的：
　　通過建立大鼠體外循環(huán)(CPB)模型,探討單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂（GM-1）對CPB腦損傷的影響及其作用機(jī)制。
　　方法：
　　成年雄性SD大鼠27只，體重350-450g，采取抽簽法隨機(jī)分為3組，每組9只，分別為空白對照組（陰性對照組，S組）、CPB對照組（陽性對照組，B組）、GM-1干預(yù)組（實(shí)驗(yàn)組，C組）。采用右頸靜脈腔房引流，右頸動脈灌注建立大鼠體外循環(huán)模型。S組模仿體外循環(huán)過程，僅在各部位插管，但不轉(zhuǎn)流，

2、予以機(jī)械通氣60min；B組轉(zhuǎn)流液中含有等量生理鹽水，體外循環(huán)時間為60min；C組轉(zhuǎn)流液中加入單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂(GM-1)20mg/kg。S組機(jī)械通氣后3h時斷頭取腦組織標(biāo)本，B組和C組CPB結(jié)束后3小時斷頭取腦組織標(biāo)本，行透射電鏡觀察皮層、海馬超微結(jié)構(gòu)變化；免疫組化法檢測p-ERK1/2、BAX和BCL-2蛋白的表達(dá)；TUNEL法標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)；Western-blot法檢測P-ERK1/2、BAX和BCL-2蛋白的活性。

3、r>　　結(jié)果：
　　B組和C組轉(zhuǎn)流中平均動脈壓、心率、PaO2、PaCO2、紅細(xì)胞比積差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　在透視電鏡下，B組大腦皮層和海馬細(xì)胞核膜模糊，核內(nèi)異染色質(zhì)凝聚、邊集，細(xì)胞器有減少或出現(xiàn)空泡化；血管內(nèi)皮細(xì)胞胞膜局部模糊，細(xì)胞間緊密連接相對松散。C組超微結(jié)構(gòu)的改變較之明顯減輕。免疫組化顯示，與S組比較，進(jìn)行CPB的B組和C組大腦皮層及海馬神經(jīng)元細(xì)胞的ERK1/2(p-ERK1/2)活性、BAX／BC

4、L-2比值及凋亡的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目增多，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與B組比較，C組ERK1/2(p-ERK1/2)活性、BAX/BCL-2比值及凋亡的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目均減少且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　Western-blot顯示，與S組比較，進(jìn)行CPB的B組和C組ERK1/2(p-ERK1/2)、BAX及BCL-2蛋白表達(dá)均增高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與B組比較，C組ERK1/2(p-ERK1/2)和BAX蛋