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文檔簡介
1、目的:探討不同濃度七氟烷預(yù)處理對大鼠體外循環(huán)腦損傷的保護(hù)作用及其對TLR9炎癥信號通路的影響。
方法:SD大鼠40只,體重350g~450g。按完全隨機(jī)數(shù)字表法分為5組(n=8):假手術(shù)組(H組):只穿刺置管不建立CPB模型;體外循環(huán)組(C組):只建立CPB模型;不同濃度七氟烷預(yù)處理組(S組): S1、S2和S3組于自制容器中分別以1.2%、2.4%以及3.6%七氟烷預(yù)處理1h后開始建立CPB模型。采用右頸靜脈引流、右股動脈灌
2、注法制備非停跳體外循環(huán)誘發(fā)大鼠腦損傷模型,維持60min。各組設(shè)6個時間點(diǎn):T0(預(yù)處理后轉(zhuǎn)流前)、T1(CPB30min)、T2(CPB1h,停轉(zhuǎn)流即刻)、T3(CPB后1h)、T4(CPB后2h)以及T5(CPB后3h)。分別于各時間點(diǎn)采集血清樣本,ELISA法檢測血清S100-β以及NF-κB濃度。于停循環(huán)后3h處死大鼠取大腦海馬組織,采用TUNEL法測海馬神經(jīng)元凋亡情況,計算陽性細(xì)胞的平均分光密度(IA)值;Western bl
3、ot法檢測腦組織TLR9蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:
1.CPB組大鼠各時間點(diǎn)MAP、HR、直腸溫及血?dú)夥治鼋Y(jié)果MAP、HR在開始轉(zhuǎn)流后明顯降低(與T0比較,P<0.05),至停轉(zhuǎn)流1h恢復(fù)原來水平(與T0比較,P>0.05);T在轉(zhuǎn)流期間維持32℃~34℃;pH值基本保持穩(wěn)定;PaCO2、PaO2在轉(zhuǎn)流前后較為穩(wěn)定(P>0.05); Hct于轉(zhuǎn)流開始后下降(P<0.05);在轉(zhuǎn)流期間K+濃度保持穩(wěn)定(P>0.05)。
4、r> 2.TUNEL法原位檢測海馬神經(jīng)元凋亡情況與H組IA值相比,C組和S1~S3組的IA值升高(P<0.05);與C組相比,S1~S3組IA值降低(P<0.05);與S1組相比,S2和S3組IA值降低(P<0.05);與S2組相比,S3組IA值降低(P<0.05)。
3.各組大鼠血清S100-β不同時間點(diǎn)ELISA檢測結(jié)果與T0相比,C組和S1~S3組T1~5血清S100-β濃度升高(P<0.05)。與H組相比,C組和S1
5、~S3組T1~5血清S100-β濃度升高(P<0.05);與C組相比,S1~S3組T1~5血清S100-β濃度降低(P<0.05);與S1組相比,S2和S3組T1~5血清S100-β濃度降低(P<0.05);與S2組相比, S3組T1~5血清S100-β濃度降低(P<0.05)。
4.各組大鼠血清NF-κB不同時間點(diǎn)ELISA檢測結(jié)果與T0相比,C組和S1~S3組T1~5血清NF-κB濃度升高(P<0.05)。與H組相比,C組
6、和S1~S3組T1~5血清NF-κB濃度升高(P<0.05);與C組相比,S1~S3組T1~5血清NF-κB濃度降低(P<0.05);與S1組相比,S2和S3組T1~5血清NF-κB濃度降低(P<0.05);與S2組相比,S3組T1~5血清NF-κB濃度降低(P<0.05)。
5.各組大鼠腦組織TLR9蛋白表達(dá)Western-blot檢測結(jié)果與H組相比,C組與S1~S3組腦組織TLR9蛋白表達(dá)升高(P<0.05);與C組相比,
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