2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  觀察intermedin(IMD)對(duì)血管緊張素II(Ang II)誘導(dǎo)的大鼠近端腎小管上皮細(xì)胞系NRK-52E纖維化的影響,并探討其機(jī)制。
  方法:
  體外培養(yǎng)的 NRK-52E細(xì)胞,隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組、Ang II干預(yù)組(10-6mol/L)、轉(zhuǎn)染IMD質(zhì)粒+Ang II干預(yù)組、轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒+Ang II干預(yù)組。采用Fugene HD轉(zhuǎn)染試劑,將pIRES2-EGFP空質(zhì)粒和pIRES2-IMD真

2、核表達(dá)質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染至NRK-52E細(xì)胞,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率,轉(zhuǎn)染成功48 h后用Ang II(10-6mol/L)干預(yù)24 h。用real-time RT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞中I型膠原(Col I)的表達(dá);Western印跡法檢測(cè)Col I、E-鈣黏蛋白(E-cadherin)的表達(dá);ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)的濃度。
  結(jié)果:
  通過熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染成

3、功后細(xì)胞的EGFP表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率為(35.73±7.28)%。與正常對(duì)照組相比,Ang II組Col I的表達(dá)顯著上調(diào)(mRNA水平t=4.835,P=0.008;蛋白質(zhì)水平P<0.001),E-cadherin的表達(dá)顯著下降(t=4.284, P=0.013);轉(zhuǎn)染IMD質(zhì)粒后Col I的表達(dá)較Ang II組明顯下降(mRNA水平t=3.032, P=0.039;蛋白質(zhì)水平P<0.001),E-cadherin的表達(dá)

4、明顯上調(diào)(t=6.054,P=0.004);而轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒后Col I、E-cadherin的表達(dá)與Ang II無明顯差別(Col I mRNA水平t=0.951,P=0.395;蛋白質(zhì)水平t=1.208,P=0.294;E-cadherin蛋白質(zhì)水平t=1.613,P=0.182)。與正常對(duì)照組相比,Ang II組細(xì)胞上清液eNOS、cGMP的濃度顯著增加(eNOS t=20.718,P<0.001;cGMP t=8.324,P=0.0

5、01);與Ang II組相比,IMD質(zhì)粒+Ang II組的濃度進(jìn)一步增加(eNOS t=10.682,P<0.001;cGMP t=18.974,P<0.001);而轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組+Ang II組eNOS及cGMP的濃度與Ang II組無明顯差別(eNOS t=2.039,P=0.111;cGMP t=1.469,P=0.216)。
  結(jié)論:
  IMD對(duì)Ang II誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞纖維化有抑制作用,可能通過eNOS-c

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