益生性乳酸菌的分離篩選及拮抗沙門氏菌感染功能的研究.pdf

1、乳酸菌因其益生功能而備受關(guān)注，研究者眾多。本研究首先自青貯飼料和酸奶樣本中分離乳酸菌。根據(jù)菌落的形態(tài)特征、革蘭氏染色、過氧化氫酶接觸試驗、生理生化特性、16SrDNA序列分析和碳水化合物試驗對其進行鑒定。然后通過耐受人工胃液、耐受膽鹽和粘附力等試驗篩選具有益生潛能的菌株。并用篩選出的乳酸菌刺激小鼠骨髓樹突狀細胞檢測其分泌的細胞因子的水平，篩選出有誘導(dǎo)Th1/Th2型免疫應(yīng)答潛能的乳酸菌。最后用篩選出的5株乳酸菌連續(xù)灌胃小鼠6周，然后對其

2、進行沙門氏菌感染，觀察發(fā)病及死亡情況，HE染色檢驗小鼠腸道病理變化，ELISA檢測小鼠腸道炎性因子IL-6和TNF-α分泌量，觀察小鼠體重和脾臟、肝臟的變化及沙門氏菌在體內(nèi)的定植量，研究其在小鼠體內(nèi)拮抗沙門氏菌感染的功能。
　　結(jié)果顯示，從青貯飼料和酸奶樣品中分離出34株乳酸菌，經(jīng)鑒定分別屬于10個種:L.brevis、L.kefiri、L.parabuchneri、L.farciminis、L.mnudanjiangensis、

3、L.mudanjiangensis、L.coryniformis、L.pantheris、L.rhamnosus、L.casei。其中同型發(fā)酵乳酸菌占91.2％，部分菌株體現(xiàn)耐高溫、低溫、低pH生長的特性。經(jīng)過耐受人工胃液、耐受膽鹽、粘附力以及刺激小鼠骨髓樹突狀細胞分泌細胞因子能力檢驗，篩選出14株具有益生潛能的菌株。將菌株TCP009、SXJ30、SXJ32、SXJ29、TCP027分別灌胃小鼠6周后對其進行攻毒并觀察免疫保護作用。結(jié)