基于組學方法及Lc-MS技術(shù)的兩種蒙藥（森登-4和丹參）作用機制研究.pdf

1、本研究結(jié)合基于組學方法及LC-MS技術(shù)分別研究了蒙藥森登-4治療類風濕關(guān)節(jié)炎的作用機制以及蒙藥丹參中的丹參多酚酸鹽治療擴張性心肌病的作用機制。
　　首先，探究蒙藥復方森登-4的配伍機制。蒙藥文冠木與梔子、川楝子、訶子以5∶3∶1∶1的比例配伍后得到蒙藥復方森登-4;配伍前后的樣品采用WatersAcquity BEH-C18柱(50 mm×2.1 mm，1.7μm)為色譜柱，0.1％甲酸水溶液-甲醇為流動相進行梯度洗脫，柱溫40℃

2、，體積流量0.4 mL/min，迸樣量10μL;并將UPLC-MS技術(shù)與主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)相結(jié)合，對蒙藥復方森登-4配伍前后組方中君藥文冠木主要化學成分變化情況進行了分析。在PCA與OPLS-DA模型中，文冠木與復方森登-4均可明顯得到區(qū)分;配伍后8個化合物在兩組間存在顯著差異(P＜0.05)，其中兒茶素、沒食子兒茶素、雙氫楊梅素、槲皮素的溶出量在配伍后下降，而xanthocerasic ac

3、id、3β-hydroxytirucalla-7,24-dien-21-oic acid、3-oxotirucalla-7,24-dien-21-oicacid、蘆丁的溶出量升高。蒙藥復方森登-4的抗炎及抗風濕活性可能與其中的君藥文冠木配伍之后某些指標成分的溶出量變化有一定關(guān)系。
　　其次，以傳統(tǒng)蒙藥方森登-4治療佐劑誘導的類風濕關(guān)節(jié)炎。將UPLC-MS技術(shù)與主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)相結(jié)合用來

4、區(qū)分正常組、模型組、森登-4治療組的代謝輪廓，并尋找潛在的生物標記物。在PCA與OPLS-DA模型中，三組大鼠的代謝輪廓可以明顯區(qū)分。利用OPLS-DA方法找到了13個潛在的生物標記物，它們分別是二十二酰胺，溶血磷脂酰乙醇胺，鳥苷磷酸腺苷，依那普利拉，強啡肽B(6-9)，磷酯酰絲氨酸，5'-鳥苷（二磷酸），二十二碳六烯酸，α-生育三烯酚，維生素D3-23羧酸，三磷酸尿苷，R）-3-羥基-棕櫚酸，二十七酸。蒙藥方森登-4可能通過影響這些生

5、物標記物的代謝通路從而達到抑制類風濕大鼠組織病理學改變的目的。
　　最后，將代謝組學與分子生物學方法相結(jié)合，研究丹參多酚酸鹽治療擴張性心肌病的作用機制。采用主成分分析(PCA)法，分析了健康組、模型組、丹參多酚酸鹽給藥組的大鼠血清代謝輪廓，采用正交校正的偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)法尋找潛在的生物標記物，經(jīng)鑒定，共得到磷酯酰絲氨酸(16∶0/18∶1(9Z))、溶血磷脂(16∶0)、溶血磷脂(20∶4(5Z，8Z，11Z，

6、14Z))、溶血磷脂(22∶6(4Z，7Z，10Z，13Z，16Z，19Z))、膽固醇硫酸酯、膽汁酸、γ-亞麻酸、二十二碳五烯酸、9'-羧基-γ-生育酚9種潛在的生物標記物。其中，γ-亞麻酸、二十二碳五烯酸、9'-羧基-γ-生育酚的含量在模型組中下降，經(jīng)丹參多酚酸鹽治療后含量上升。通過Western bloting法與酶聯(lián)免疫吸附法證實丹參多酚酸鹽通過影響體內(nèi)與γ-亞麻酸、9'-羧基-γ-生育酚相關(guān)的超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(M