抗腫瘤肽的優(yōu)化設(shè)計及抗腫瘤機制研究.pdf

1、在全球范圍內(nèi)，癌癥有著較高的發(fā)病率和致死率?，F(xiàn)在，一些治療癌癥的藥物不僅有多種副作用，而且還可能會引起多重耐藥。而抗腫瘤多肽作為一種新型的治療癌癥的藥物，因為它具有對腫瘤細胞有選擇性、不易引起耐藥性等特點，正越來越受到人們的關(guān)注。許多抗腫瘤肽是從自然界生物內(nèi)中獲得的。這種直接來源于生物體內(nèi)的抗腫瘤肽一般肽鏈較長，無法用化學(xué)法合成。通過序列優(yōu)化的方法獲得的短鏈抗腫瘤肽可以利用化學(xué)法合成，有利于降低成本，提高抗腫瘤肽的抗腫瘤效率。
　

2、　本研究中，對Mauriporin進行螺旋輪模型分析后，截取了它的活性中心片段(FKIGGFIKKLWRSKLA)，命名為ZXR-1。利用CD實驗發(fā)現(xiàn)，ZXR-1可以在類似于細胞膜的疏水環(huán)境中形成α-螺旋構(gòu)象。MTT實驗顯示，多肽ZXR-1對Hela(IC50=62.6μM)，SACC-83(IC50=27.9μM)，HepG2(IC50=141.7μM),HuH-7(IC50=77.9μM),PC-3(IC50=69.1μM)等腫瘤細

3、胞具有抑制增殖能力。通過LDH釋放實驗及Western blot等實驗發(fā)現(xiàn)，ZXR-1可以導(dǎo)致Hela細胞中乳酸脫氫酶的釋放及Caspase-3的活化，說明ZXR-1同時具有裂解細胞膜和誘導(dǎo)細胞凋亡兩種作用機制。
　　然后，利用螺旋輪模型對ZXR-1序列進行分析。發(fā)現(xiàn)ZXR-1的螺旋結(jié)構(gòu)可以明顯地分為親水界面和疏水界面，在疏水面存在一個極性的Lys。我們使用非極性的Leu替換了極性的Lys，得到了ZXR-2序列(FKIGGFIKK

4、LWRSLLA)。MTT檢測后發(fā)現(xiàn)，ZXR-2的對上述5種腫瘤細胞的抑制能力得到了極大的提高(IC50=7.5-14.2μM)。凋亡及裂解實驗顯示，ZXR-2主要通過裂解細胞膜的機制抑制腫瘤細胞增殖，而不會引起腫瘤細胞的凋亡。
　　本文通過序列優(yōu)化得到了兩條抗腫瘤多肽ZXR-1和ZXR-2。并對這兩條多肽的抗腫瘤機制進行了研究。研究結(jié)果顯示，通過改變一個氨基酸可以有效地提高抗腫瘤肽的抗腫瘤活性，同時還可以改變它的抗腫瘤機制。為以后