免疫營(yíng)養(yǎng)對(duì)腸粘膜屏障功能的影響.pdf

1、目的：觀察腸缺血再灌注術(shù)后腸粘膜屏障功能的變化，初步探討腸粘膜屏障的損傷機(jī)制，研究免疫營(yíng)養(yǎng)對(duì)腸缺血再灌注大鼠腸粘膜屏障的保護(hù)作用，為免疫營(yíng)養(yǎng)的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)選用雄性SD大鼠50只，按隨機(jī)原則分為五組，每組10只：①正常對(duì)照組(C)：正常飼養(yǎng)進(jìn)食。②腸系膜上動(dòng)脈夾閉+胃造瘺+普通腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組(LMSA-EN)；③腸系膜上動(dòng)脈夾閉+胃造瘺+免疫增強(qiáng)腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組(LMSA-EIN)；④胃造瘺+普通腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組(E

2、N)；⑤胃造瘺+免疫增強(qiáng)腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組(EIN)；建立大鼠腸缺血再灌注模型，分別給予不同營(yíng)養(yǎng)，術(shù)后1、4、7天分別取外周血，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T細(xì)胞亞群。ELISA法檢測(cè)血漿內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子α、白介素1β、二胺氧化酶、D乳酸；各組大鼠于術(shù)后7天斷頸處死，消毒，然后分別切取末端回腸及結(jié)腸各3cm(距回盲部3cm)，行HE及免疫組織化學(xué)染色，檢測(cè)Occludin和sIgA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.體重變化：術(shù)后體重較術(shù)

3、前減輕(P<0.05)，LMSA-EN組較LMSA-EIN組減輕明顯(18.20±7.61 vs12.00±3.86，P<0.05)；EN組較EIN組減輕明顯(13.40±2.59vs7.60±5.38，P<0.05)。
　　 2.腸粘膜病理改變：各組大鼠小腸粘膜厚度、絨毛高度、隱窩深度比較，腸缺血模型組較對(duì)照組均有不同程度下降，存在顯著性差異，且LMSA-EN組下降較LMSA-EIN組明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3

4、.腸粘膜病理?yè)p傷評(píng)分：各組間存在顯著性差異，LMSA-EN組病理?yè)p傷評(píng)分顯著高于C組(30.70±4.45 vs14.70±3.16，P<0.01)；LMSA-EIN組的病理?yè)p傷評(píng)分顯著低于LMSA-EN組(25.60±4.33 vs30.70±4.45，P<0.05)；EIN組的病理?yè)p傷評(píng)分顯著低于EN組(16.30±2.75 vs22.40±2.67，P<0.01)。
　　 4.免疫組化染色：Occludin免疫組化染色以上

5、皮細(xì)胞胞膜及胞質(zhì)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，各組均可見(jiàn)有陽(yáng)性表現(xiàn)，組間陽(yáng)性細(xì)胞百分率存在顯著性差異，LMSA-EIN較LMSA-EN組升高(P<0.01)；EIN較EN組升高(P<0.05)；sIgA免疫組化染色以上皮細(xì)胞及漿細(xì)胞棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，各組均可見(jiàn)有陽(yáng)性表現(xiàn)，組間陽(yáng)性細(xì)胞百分率存在顯著性差異，LMSA-EIN較LMSA-EN組升高(P<0.05)；EIN較EN組升高(P<0.05)。
　　 5.外周血CD4+/CD8+：

6、各組間存在顯著性差異，LMSA-EN組較術(shù)前有所降低(P<0.05)，LMSA-EN組降低較LMSA-EIN組明顯(P<0.05)，EN組降低較EIN明顯(P<0.05)。
　　 6.術(shù)后血漿內(nèi)毒素、TNF-α、IL-1β、DAO、D乳酸均較術(shù)前明顯增高，第1、4、7天逐漸降低，免疫營(yíng)養(yǎng)組下降較普通營(yíng)養(yǎng)組明顯，但仍高于術(shù)前水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1.成功建立大鼠腸粘膜缺血再灌注模型，大鼠術(shù)后

7、體重下降，小腸形態(tài)學(xué)改變表現(xiàn)為絨毛壞死，隱窩消失，腸屏障功能改變表現(xiàn)為機(jī)械屏障功能受損(腸粘膜Occludin蛋白表達(dá)減少)、腸免疫屏障受損(腸粘膜sIgA含量下降，T細(xì)胞亞群降低，腫瘤壞死因子α、白介素1β等不同程度升高)，同時(shí)發(fā)生腸粘膜通透性改變(內(nèi)毒素、D乳酸升高)等。
　　 2.腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)能在一定程度上保護(hù)腸粘膜屏障功能。
　　 3.免疫營(yíng)養(yǎng)進(jìn)一步減輕腸缺血導(dǎo)致大鼠腸粘膜的破壞，減輕體重丟失；增加大鼠腸粘膜Occl