煤工塵肺大鼠腦皮層損害與ICAM-1和COX-2表達(dá)的研究.pdf

1、研究背景：
　　 近年來(lái)，隨著煤炭需求量的劇增，采煤生產(chǎn)機(jī)械化程度及強(qiáng)度不斷提高，生產(chǎn)場(chǎng)所粉塵濃度隨之上升，在我國(guó)一些煤炭大省，煤工塵肺的罹患率很高。在煤工塵肺的進(jìn)展過(guò)程中容易并發(fā)多種并發(fā)癥而使病情惡化以致死亡。調(diào)查發(fā)現(xiàn)2000年以后，煤工塵肺并發(fā)腦血管腦疾病升為煤工塵肺患者的主要死亡原因[1]。因此，探討煤工塵肺合并腦皮層損害的機(jī)制對(duì)改善塵肺患者的生存質(zhì)量、降低死亡率有重要意義。目前，有關(guān)煤工塵肺合并腦組織損害的病理機(jī)制的研究

2、較少。慢性缺氧對(duì)腦功能的損害正逐漸引起人們的關(guān)注。研究認(rèn)為，腦缺氧或缺血時(shí)可產(chǎn)生大量炎性介質(zhì)[2-5]，腦內(nèi)炎癥反應(yīng)在大腦皮層損害的病理過(guò)程中起著很重要的作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立塵肺模型，研究煤工塵肺所致低氧對(duì)大腦皮層的影響及其導(dǎo)致腦損傷過(guò)程中ICAM-1和COX-2兩種致炎因子的表達(dá)狀況及其意義。
　　 目的：
　　 建立實(shí)驗(yàn)性煤工塵肺大鼠模型，免疫組化分析方法檢測(cè)煤工塵肺并發(fā)腦損害過(guò)程中細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）

3、和環(huán)氧合酶-2（COX-2）大鼠腦皮層的定位表達(dá)，初步探討染塵大鼠發(fā)生腦皮層損傷的可能機(jī)制，及其潛在的病理意義。
　　 研究對(duì)象和方法：
　　 （1）采用非暴露氣管內(nèi)注入法制備實(shí)驗(yàn)性煤工塵肺大鼠模型，(190±20)g 左右雄性Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為模型組（30只）和對(duì)照組（30只），于實(shí)驗(yàn)第4、8、20周時(shí)每組各取10只大鼠，采動(dòng)脈血0.3ml 送血?dú)夥治?，采血后立即斷頭取腦、游離雙肺并固定標(biāo)本以備石蠟包埋；

4、（2）HE 染色觀察染塵大鼠肺組織形態(tài)學(xué)變化；（3）Nissle 染色評(píng)價(jià)大鼠腦皮層神經(jīng)元形態(tài)學(xué)變化；（4）免疫組化分析方法檢測(cè)大鼠大腦皮層ICAM-1及COX-2的表達(dá)情況，并評(píng)價(jià)其病理意義，探討ICAM-1及COX-2在腦皮層損傷過(guò)程中的作用機(jī)制；（5）用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 結(jié)果：
　　 （1）血?dú)夥治鼋Y(jié)果：4周、8周、20周時(shí)模型組平均血氧分壓為(85.51±7.09)、(76.44±5

5、.50)、(69.79±6.91)，同期各時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組平均血氧分壓為（97.85±4.91）、（98.05±4.58）、（96.41±5.25）。
　　 （2）肺部病理形態(tài)學(xué)觀察：染塵4-8周時(shí)，病理可見(jiàn)肺泡壁及支氣管壁有廣泛炎細(xì)胞浸潤(rùn)，主要為巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞，部分肺泡腔內(nèi)可見(jiàn)大量吞噬了煤塵的肺泡巨噬細(xì)胞及煤塵聚集形成的煤斑或結(jié)節(jié)病灶周?chē)糠址闻萸粩U(kuò)大含氣增加。染塵20周可見(jiàn)肺組織內(nèi)支氣管壁及肺泡壁增厚，肺間質(zhì)內(nèi)有膠原纖維增生

6、，大片肺纖維化形成。
　　 （3）Nissle 染色觀察：模型組8周時(shí)大鼠神經(jīng)元內(nèi)尼氏體含量減少、顆粒脫失、胞核固縮、著色不均勻，20周時(shí)神經(jīng)元數(shù)目減少、尼氏體含量顯著減少、輪廓模糊、部分胞質(zhì)溶解；對(duì)照組大鼠腦組織神經(jīng)元數(shù)目多，緊密而均勻，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，核仁明顯，胞漿染色清晰，其內(nèi)尼氏體均勻豐富。
　　 （4）免疫組化半定量結(jié)果：① ICAM-1平均光密度值4周、8周、20周時(shí)模型組與對(duì)照組分別為（0.2034±

7、0.0075）（0.0378±0.0077）、（0.2241±0.0076）（0.0286±0.0050）、（0.2454±0.0276）（0.0348±0.0077）②COX-2平均光密度值4周、8周、20周時(shí)模型組與對(duì)照組分別為（0.2298±0.0121）（0.0585±0.0071）、（0.2614±0.0188）(0.0550±0.0125)、（0.2994±0.0119）（0.0530±0.1039）。
　　 結(jié)論：