植入物界面結(jié)核分枝桿菌生物膜形成的實驗研究.pdf

1、【目的】研究不同植入物界面結(jié)核分枝桿菌的粘附能力及生物膜形成情況，同時觀察抗結(jié)核藥物利福平對結(jié)核分枝桿菌粘附能力及生物膜的影響，以及骨結(jié)核病灶內(nèi)結(jié)核分枝桿菌在植入物界面形成生物被膜的情況，探討一期內(nèi)固定或關(guān)節(jié)成行技術(shù)治療活動性骨與關(guān)節(jié)結(jié)核的可行性和安全性，為內(nèi)固定術(shù)或人工關(guān)節(jié)成行術(shù)治療活動性骨結(jié)核安全可靠的原因提供堅實的基礎(chǔ)理論依據(jù)。
　　【方法】將鈦合金、鈷鉻鉬合金、聚乙烯三種材料的植入物在無菌條件下分別置于用Middlebro

2、ok7H9液體培養(yǎng)基制備的結(jié)核分枝桿菌懸浮液中，共同培養(yǎng)4周后，隨機(jī)取出1塊，再加入利福平溶液繼續(xù)培養(yǎng)2周。樣品經(jīng)固定、干燥、噴金后，運(yùn)用電子顯微鏡觀察，并計數(shù)植入物界面單位面積粘附菌落數(shù)，比較結(jié)核分枝桿菌對不同植入物（鈦合金、鈷鉻鉬合金、聚乙烯）、界面（光滑面、粗糙面）的粘附能力，并觀察利福平干預(yù)前后植入物界面生物膜結(jié)構(gòu)。收集骨結(jié)核內(nèi)固定術(shù)后復(fù)發(fā)患者再次手術(shù)時取出的內(nèi)置物，經(jīng)固定、干燥、噴金后，采用掃描電子顯微鏡觀察取出內(nèi)固定物界面結(jié)

3、核生物被膜的形成情況。
　　【結(jié)果】利福平干預(yù)前，聚乙烯界面黏附的菌落數(shù)顯著多于鈷鉻鉬界面，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；鈷鉻鉬材料界面黏附的菌落數(shù)與鈦合金材料界面相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；利福平干預(yù)后，三種植入物界面黏附菌落數(shù)均顯著減少，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。植入物界面粗糙度不同，結(jié)核分枝桿菌的粘附能力不同，更容易黏附于植入物的粗糙界面。植入物界面與材料屬性之間具有一階交互作用(P<0.05)。結(jié)核分枝桿菌在鈦

4、合金、鈷鉻鉬材料界面未見生物膜形成；在聚乙烯界面能見典型的生物膜形成，但利福平干預(yù)能抑制，甚至破壞結(jié)核生物膜。從骨結(jié)核病灶內(nèi)取出的植入物界面僅見散在結(jié)核分枝桿菌粘附，或是干癟或是裂解，未見結(jié)核生物膜形成。
　　【結(jié)論】結(jié)核分支桿菌對植入物的粘附能力與植入物的材料屬性、界面狀態(tài)有關(guān)，可在植入物界面形成生物膜，但具有選擇性和特異性。利福平干預(yù)能降低結(jié)核分支桿菌粘附植入物界面的能力，而且能抑制，甚至破壞結(jié)核生物膜。骨結(jié)核病灶內(nèi)，未見結(jié)核