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文檔簡介
1、血管內皮細胞參與血管形成、血管穩(wěn)態(tài)維持、血栓形成、炎癥和血管重建等生理和病理過程。血管內皮細胞在血管功能控制方面扮演了重要角色,對血管自身穩(wěn)定起主要調控作用。 為了便于通過Cre/LoxP系統(tǒng)研究相關基因在血管內皮細胞中的功能,本文創(chuàng)建了Tie2-Cre轉基因小鼠,利用血管內皮細胞特異性表達的Tie2基因的啟動子和增強子驅動Cre重組酶基因在血管內皮細胞中表達。通過顯微注射的方法將15.9kb的轉基因片段Tie2-Cre引入小鼠
2、受精卵,獲得子代小鼠57只,經(jīng)基因型鑒定有6只小鼠在基因組上整合有Tie2-Cre基因,整合率為11%。通過多組織的RT-PCR證實在所有組織都能檢測到Cre重組酶的轉錄。為了驗證Cre重組酶在轉基因小鼠中表達的細胞分布及其在體內介導重組的功能,將Tie2-Cre轉基因小鼠分別與Smad4條件基因打靶小鼠和ROSA26轉基因小鼠交配。Tie2-Cre;Smad4Co/+小鼠的多組織基因組DNA的PCR結果顯示Cre重組酶在所有包含血管內
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