熱灸效應(yīng)與穴位敏化的機(jī)制——從脊髓到腦干.pdf

1、古希臘醫(yī)學(xué)之父Hippocrates強(qiáng)調(diào):病,藥不可治時(shí)用鐵(針或刀)治；鐵不治時(shí)用火治；火不治時(shí),該病無法可治。我國(guó)明代醫(yī)家李梃在其著作《醫(yī)學(xué)入門》中寫到:“凡藥之不及,針之不到,必須灸之”,由此可見針灸療法,尤其是灸法在中醫(yī)藥學(xué)中的地位。但是步入近代以來,隨著“重針輕灸”的趨勢(shì),灸療的臨床陣地逐漸萎縮,同時(shí),灸療的科學(xué)研究滯后也是影響其在全世界推廣的重要因素。
　　 本項(xiàng)目利用可對(duì)分級(jí)強(qiáng)度和分級(jí)面積刺激發(fā)生規(guī)律性應(yīng)答反應(yīng)的脊

2、髓背角會(huì)聚神經(jīng)元和延髓背側(cè)網(wǎng)狀核全身異覺異位會(huì)聚神經(jīng)元作為研究的模型,來探討生理／病理狀態(tài)下不同面積和不同強(qiáng)度溫度熱灸對(duì)會(huì)聚神經(jīng)元的量-效激活反應(yīng),以期闡明最佳熱灸刺激參數(shù)、熱敏化腧穴是否在病理情況下導(dǎo)致了致敏、熱敏化腧穴效應(yīng)以及熱灸法作用的神經(jīng)科學(xué)調(diào)節(jié)機(jī)制,進(jìn)一步提高灸療療效并為其理論的科學(xué)化提供一些實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 1材料方法
　　 實(shí)驗(yàn)選用雄性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠,重220～320g,用烏拉

3、坦(urethane,1.0～1.2g／kg)腹腔注射麻醉。采用鎢絲或玻璃微電極胞外記錄單細(xì)胞放電。
　　 實(shí)驗(yàn)分兩大部分進(jìn)行,在大鼠脊髓和延髓分別記錄神經(jīng)元的單細(xì)胞自發(fā)放電活動(dòng),對(duì)直結(jié)腸擴(kuò)張(colorectaldistension,CRD)的反應(yīng)以及熱灸對(duì)CRD誘發(fā)的反應(yīng)的影響。在脊髓背角記錄到的神經(jīng)元檢查其外周感受野對(duì)機(jī)械刺激(包括觸刺激、vonFrey觸覺反應(yīng)敏感度、齒鑷夾皮刺激),觀察它們的感受野分布范圍、感受野大小,

4、量化反應(yīng)的性質(zhì)及反應(yīng)的強(qiáng)度。觀察不同面積和溫度的熱灸感受野和非感受野穴位對(duì)CRD引起的神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響。在延髓記錄到的神經(jīng)元檢查其對(duì)全身各部位的機(jī)械刺激、電刺激等的反應(yīng),同樣觀察這些神經(jīng)元對(duì)直結(jié)腸擴(kuò)張刺激的反應(yīng)。隨后觀察不同面積和溫度的熱灸對(duì)CRD引起的神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響。觀察長(zhǎng)時(shí)間CRD(>5min)前后,兩種神經(jīng)元對(duì)不同參數(shù)穴位熱灸的反應(yīng),以觀察穴位的熱敏化效應(yīng)。
　　 內(nèi)臟傷害性刺激采用直結(jié)腸擴(kuò)張法,將長(zhǎng)約5～6cm

5、的氣囊經(jīng)肛門插入直結(jié)腸,插入的深度約為4cm。內(nèi)臟傷害性傳入由插入直腸內(nèi)的氣囊充氣超過20～50s造成CRD,檢驗(yàn)的直結(jié)腸壓力一般控制在80mmHg左右(≥40mmHg為傷害性刺激)。
　　 2結(jié)果
　　 2.1脊髓水平的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　 在脊髓水平的實(shí)驗(yàn)中,于53只SD大鼠的腰1-3節(jié)段共記錄到137個(gè)神經(jīng)元,其中廣動(dòng)力型神經(jīng)元(WideDynamicRangeNeuron,WDR)115個(gè),該類神經(jīng)元為本實(shí)驗(yàn)的

6、研究對(duì)象,其他類型的神經(jīng)元22個(gè)。大多數(shù)WDR神經(jīng)元在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)沒有自發(fā)背景活動(dòng),偶見單個(gè)的或簇狀的放電,放電頻率很低。
　　 在10個(gè)WDR神經(jīng)元觀察的80mmHg直結(jié)腸擴(kuò)張(CRD)刺激引起的神經(jīng)元的反應(yīng),刺激后與刺激前的空白對(duì)照組相比有非常顯著的差異(P<0.001),表明來自同神經(jīng)節(jié)段的內(nèi)臟傷害性強(qiáng)度的傳入能明顯激活背角神經(jīng)元。這類神經(jīng)元對(duì)感受野的非傷害彎毛刺激、輕壓刺激發(fā)生輕微的激活反應(yīng),也對(duì)各種傷害性強(qiáng)度的機(jī)械刺激如

7、夾皮等發(fā)生明顯的激活反應(yīng)。
　　 我們?cè)贑RD引起脊髓WDR神經(jīng)元穩(wěn)定激活的基礎(chǔ)上,觀察了體表非感受野(以“承扶”穴位為中心)不同參數(shù)的熱灸對(duì)CRD引起的神經(jīng)元激活反應(yīng)的影響。當(dāng)刺激溫度為40℃和42℃時(shí),無論刺激面積多大,熱灸對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)都沒有產(chǎn)生任何影響。
　　 當(dāng)刺激溫度為44℃時(shí),大部分面積的熱灸刺激對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)都沒有產(chǎn)生影響,只是在刺激面積直徑為3.5cm時(shí),熱灸

8、對(duì)由CRD引起的WDR神經(jīng)元的放電反應(yīng)有抑制作用(P<0.05)。
　　 當(dāng)刺激溫度為46℃,刺激面積直徑為1.0cm和1.5cm時(shí),熱灸刺激對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活作用的影響與對(duì)照組相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。46℃-φ2.0cm的熱灸對(duì)CRD所引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)抑制率為20±2.45％,與對(duì)照相比有差異(P<0.05)。46℃-Φ2.5cm組合熱灸的抑制效應(yīng)與對(duì)照相比有顯著差異(P<0.01)。46℃-Φ3.0cm

9、組合熱灸的抑制效應(yīng)與對(duì)照相比有顯著差異(P<0.01)。與前兩種刺激組合類似,46℃-Φ3.5cm組合熱灸的抑制效應(yīng)與對(duì)照相比有顯著差異(P<0.01)。46℃-Φ4.0cm組合熱灸的抑制效應(yīng)與對(duì)照相比有差異(P<0.05)。
　　 我們發(fā)現(xiàn)當(dāng)刺激溫度為48℃,刺激面積直徑為1.0cm時(shí),熱灸刺激對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活作用沒有影響。當(dāng)刺激面積直徑達(dá)到1.5cm時(shí),48℃的熱灸刺激開始出現(xiàn)抑制作用。48℃-Φ1.5cm和

10、48℃-Φ4.0cm組合熱灸的抑制效應(yīng)與對(duì)照相比有明顯差異(P<0.05)。當(dāng)刺激面積直徑為2.0、2.5、3.0、3.5cm時(shí),4個(gè)組合的48℃熱灸的抑制效應(yīng)與對(duì)照相比均有極顯著的差異(P<0.001),說明在這幾種刺激參數(shù)下,熱灸有非常好的抑制內(nèi)臟疼痛的作用。
　　 50℃-Φ1.0cm組合的熱灸對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活作用沒有影響。
　　 50℃-Φ1.5cm組合的熱灸對(duì)CRD所引起的WDR神經(jīng)元激活反應(yīng)的

11、抑制效應(yīng)與對(duì)照相比有明顯差異(P<0.01)。當(dāng)刺激面積直徑達(dá)到2.0cm～4.0cm之后,我們發(fā)現(xiàn)50℃的熱灸對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)都有非常明顯的抑制作用。50℃-Φ2.0cm、50℃-Φ2.5cm、50℃-Φ3.0cm、50℃-Φ3.5cm、50℃-Φ4.0cm組合熱灸的抑制效應(yīng)與對(duì)照組相比均存在非常顯著的差異(P<0.001)。但是我們把48℃-Φ2.0cm、48℃-Φ2.5cm、48℃-Φ3.0cm、48℃-Φ3.

12、5cm四個(gè)組合分別與50℃-Φ2.0cm、50℃-Φ2.5cm、50℃-Φ3.0cm、50℃-Φ3.5cm相對(duì)比發(fā)現(xiàn),50℃的熱灸對(duì)CRD誘發(fā)的WDR神經(jīng)元的放電反應(yīng)的抑制作用并不比48℃的熱灸所產(chǎn)生的抑制作用更強(qiáng),各組之間相比較均不存在顯著差異(P>0.05)。
　　 52℃-Φ1.0cm組合同樣沒有抑制作用。當(dāng)刺激面積直徑為1.5cm時(shí),我們發(fā)現(xiàn),52℃的熱灸可以使CRD對(duì)WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)從16.75±3.18spik

13、es／s下降到熱灸時(shí)的9.58±3.21spikes／s,抑制率為39.21±3.15％,與對(duì)照相比有明顯差異(P<0.01)。52℃-Φ2.0cm、52℃-Φ2.5cm、52℃-Φ3.0cm、52℃-Φ3.5cm、52℃-Φ4.0cm抑制率分別為44.78±1.35％、50.21±3.15％、52.78±5.35％、47.78±5.35％、51.78±5.35％。以上五個(gè)刺激組合與對(duì)照組相比均存在非常顯著的差異(P<0.001)。同樣

14、,我們把52℃-Φ2.0cm、52℃-Φ2.5cm、52℃-Φ3.0cm、52℃-Φ3.5cm四個(gè)組合分別與50℃-Φ2.0cm、50℃-Φ2.5cm、50℃-Φ3.0cm、50℃-Φ3.5cm相對(duì)比發(fā)現(xiàn),52℃的熱灸對(duì)CRD誘發(fā)的WDR神經(jīng)元的放電反應(yīng)的抑制作用也沒有比50℃的熱灸所產(chǎn)生的抑制作用更強(qiáng),各組之間相比較均不存在顯著差異(P>0.05):而把48℃-Φ2.0cm、48℃-Φ2.5cm、48℃-Φ3.0cm、48℃-Φ3.5

15、cm四個(gè)組合分別與52℃-Φ2.0cm、52℃-Φ2.5cm、52℃-Φ3.0cm、52℃-Φ3.5cm相比較也發(fā)現(xiàn)52℃的熱灸對(duì)CRD誘發(fā)的WDR神經(jīng)元的放電反應(yīng)的抑制作用也沒有比48℃的熱灸所產(chǎn)生的抑制作用更強(qiáng),各組之間相比較均不存在顯著差異(P>0.05)。
　　 而在觀察體表感受野(主要是以“承扶”穴為中心)的不同參數(shù)熱灸對(duì)CRD引起的脊髓背角WDR神經(jīng)元激活反應(yīng)的影響我們發(fā)現(xiàn):
　　 46℃-Φ1.5cm組合的

16、熱灸對(duì)CRD的激活反應(yīng)沒有任何影響。而46℃-Φ2.5cm組合則使得WDR神經(jīng)元從單純CRD時(shí)的15.46±3.22spikes／s再增加2.15±1.49spikes／s。與熱灸前的單純CRD相比有差異(P<0.05)。46℃-Φ3.5cm組合則使得WDR神經(jīng)元從單純CRD時(shí)的18.21±2.14spikes／s再增加3.21±2.12spikes／s,與熱灸前的單純CRD相比有差異(P<0.05)。
　　 48℃-Φ1.5c

17、m組合的熱灸可以進(jìn)一步增加CRD的激活反應(yīng),WDR的放電從熱灸前的12.35±2.54spikes／s增加為16.57±3.65spikes／s,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果表明,與熱灸前的單純CRD相比有顯著差異(P<0.01)。而48℃-Φ2.5cm和48℃-Φ3.5cm組合則分別使得WDR神經(jīng)元從單純CRD時(shí)的13.78±2.53spikes／s和17.82±5.23spikes／s再增加5.15±2.14spikes／s和8.14±1.24spi

18、kes／s,此二組合與熱灸前的單純CRD相比有極顯著差異(P<0.001)。
　　 50℃-Φ1.5cm組合的熱灸可以進(jìn)一步增加CRD的激活反應(yīng),WDR的放電從熱灸前的13.14±2.74spikes／s增加為15.17±2.65spikes／s。而50℃-Φ2.5cm和50℃-Φ3.5cm組合則分別使得WDR神經(jīng)元從單純CRD時(shí)的11.78±1.57spikes／s和12.82±3.25spikes／s再增加4.85±3.24

19、spikes／s和6.20±1.56spikes／s,此二組合與熱灸前的單純CRD相比有極顯著差異(P<0.001)。
　　 為了探討脊髓上中樞在介導(dǎo)熱灸對(duì)內(nèi)臟傷害性反應(yīng)影響的作用,本實(shí)驗(yàn)觀察了脊髓化前后熱灸對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元激活反應(yīng)的影響。在脊髓T1-2節(jié)段剪開椎板,暴露脊髓。
　　 在可逆轉(zhuǎn)的急性冷凍脊髓化前的對(duì)照實(shí)驗(yàn)中,80mmHg的CRD引起背角WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)強(qiáng)度可達(dá)11.81±1.56spike

20、s／s,而在急性脊髓化情況下,同樣強(qiáng)度的CRD則引起神經(jīng)元激活到14.28±1.23spikes／s,兩者的差別顯著(P<0.05),說明脊髓上中樞在完整情況下對(duì)內(nèi)臟傷害傳入存在下行性抑制作用。在脊髓化前的對(duì)照實(shí)驗(yàn)中,我們記錄到的20個(gè)腰髓背角WDR神經(jīng)元被80mmHg的CRD激活的反應(yīng)強(qiáng)度為11.81±1.56spikes／s,此時(shí)記錄神經(jīng)元的對(duì)側(cè)非感受野主要以“承扶穴”為中心所施加的熱灸對(duì)CRD的這種激活反應(yīng)有明顯的抑制作用,CRD

21、引起背角WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)下降到4.24±1.12spikes／s,抑制了60.57±4.26％(P<0.001)。
　　 但在用生理鹽水碎冰塊置于暴露的胸髓造成可逆轉(zhuǎn)的急性脊髓化后的5～10min內(nèi),80mmHgCRD引起的脊髓背角WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)強(qiáng)度可達(dá)14.28±1.23spikes／s,此時(shí)給予非感受野區(qū)熱灸對(duì)CRD激活反應(yīng)的抑制作用幾乎完全消失,WDR神經(jīng)元對(duì)CRD的激活反應(yīng)強(qiáng)度仍然達(dá)到14.02±3.21s

22、pikes／s,與熱灸前的效應(yīng)無統(tǒng)計(jì)學(xué)的差異(P>0.05)。
　　 去除冷凍胸髓的冰塊,用脫脂棉吸干脊髓的冰水,代之于灌注38℃左右的石臘油,5～10min后可基本恢復(fù)脊髓的正常功能。此時(shí)再給予動(dòng)物非感受野與脊髓化后相同參數(shù)的熱灸,我們可以看到對(duì)CRD激活的WDR神經(jīng)元反應(yīng)的抑制作用又可重新顯現(xiàn),并可逐步恢復(fù)到急性脊髓化前的對(duì)照水平。
　　 為了研究腧穴敏化前后不同參數(shù)熱灸對(duì)WDR神經(jīng)元激活強(qiáng)度的差異,闡明熱敏化腧穴是

23、否在病理情況下導(dǎo)致了致敏以及其致敏的強(qiáng)度,我們觀察了長(zhǎng)時(shí)間給予大鼠傷害性CRD造成內(nèi)臟損傷前后不同參數(shù)熱灸對(duì)WDR神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響。參照前面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們選擇了部分組合的熱灸來進(jìn)行此部分實(shí)驗(yàn)。40℃-Φ1.0cm在內(nèi)臟損傷前后對(duì)WDR神經(jīng)元的活動(dòng)基本都沒有影響:40℃-Φ2.0cm在內(nèi)臟損傷前沒有激活WDR神經(jīng)元,而在長(zhǎng)時(shí)間CRD后則可以使之激活,熱灸前后相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；40℃-Φ4.0cm熱灸組合的結(jié)果與40℃

24、-Φ2.0cm類似,長(zhǎng)時(shí)間CRD結(jié)束之后再給予大鼠熱灸刺激可使得WDR神經(jīng)元的反應(yīng)顯著增加(P<0.05)。但是CRD后的40℃-Φ2.0cm和40℃-Φ4.0cm兩個(gè)組合的熱灸對(duì)WDR神經(jīng)元的激活作用之間相比較則沒有顯著差異(P>0.05)。
　　 當(dāng)刺激溫度為44℃時(shí),三種刺激面積的熱灸在CRD之前都不能激活WDR神經(jīng)元。而在長(zhǎng)時(shí)間的CRD刺激之后,。44℃-Φ1.0cm組合熱灸引起的WDR神經(jīng)元激活反應(yīng)是對(duì)照組的106±2

25、.61％,二者有明顯差異(P<0.05),與CRD前的熱灸效應(yīng)相比,二者也存在顯著差異(P<0.05)；44℃-Φ2.0cm組合的熱灸引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)是對(duì)照組的107±1.83％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示二者之間存在顯著差異(P<0.05)而同樣與CRD前的熱灸效應(yīng)相比,二者也存在顯著差異(P<0.05)；44℃-Φ4.0cm組合的熱灸引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)是對(duì)照組的114±1.34％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示二者之間存在顯著差異(P<0

26、.01),與CRD前的熱灸效應(yīng)相比,二者也存在顯著差異(P<0.01)；但是我們發(fā)現(xiàn),44℃-Φ1.0cm與44℃-Φ2.0cm兩組的熱灸效應(yīng)之間相比不存在顯著差異(P>0.05),但是44℃-Φ1.0cm與44℃-Φ2.0cm兩組分別與44℃-Φ4.0cm組相比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。說明隨著刺激面積的增大相同溫度的熱灸在內(nèi)臟損傷后對(duì)WDR神經(jīng)元的激活作用是逐漸增強(qiáng)的。
　　 當(dāng)刺激溫度為48℃時(shí),48℃-Φ1.0c

27、m的熱灸在CRD之前能輕微地激活WDR神經(jīng)元,但是與背景放電相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；而在長(zhǎng)時(shí)間的CRD刺激之后,48℃-Φ1.0cm、48℃-Φ2.0cm、48℃-Φ4.0cm三個(gè)組合的熱灸均能使WDR神經(jīng)元產(chǎn)生興奮性反應(yīng)。48℃-Φ1.0cm組合引起的WDR的激活反應(yīng)是CRD前對(duì)照組的111±2.21％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示與對(duì)照組相比有明顯差異(P<0.01)；48℃-Φ2.0cm組合的熱灸在CRD之前引起的WDR神經(jīng)元的激活

28、反應(yīng)是空白對(duì)照組的112.3±2.21％(P<0.01),在CRD之后48℃-Φ2.0cm組合的熱灸可以使WDR神經(jīng)元放電增加為對(duì)照組的123.3±2.34％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果表明二者存在極顯著的差異(P<0.001),而CRD后熱灸對(duì)WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)與CRD前熱灸相比存在明顯差異(P<0.05)；48℃-Φ4.0cm組合的熱灸在CRD前引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)是空白對(duì)照組的111±3.31％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示二者之間存在顯著差異(P

29、<0.01),而在CRD之后48℃-Φ4.0cm組合的熱灸可以使WDR神經(jīng)元放電增加為對(duì)照組的127.1±1.25％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果表明二者存在極顯著的差異(P<0.001),而CRD后熱灸對(duì)WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)與CRD前熱灸相比存在明顯差異(P<0.01)。
　　 2.2延髓水平的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　 在48只SD雄性成年大鼠的延髓背側(cè)共記錄到105個(gè)神經(jīng)元。其中延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核(SubnucleusRcticularisDo

30、rsalis,SRD)神經(jīng)元共89個(gè),三叉神經(jīng)脊束核神經(jīng)元16個(gè)。鼠全身各部位的閾上電刺激(2msduration)均可激活SRD神經(jīng)元。所有的SRD神經(jīng)元不對(duì)任何形式的非傷害性刺激(如聲、光、和本體刺激等)發(fā)生反應(yīng),對(duì)全身傷害性范圍內(nèi)的機(jī)械刺激(如有齒捏夾皮)、48℃的熱水刺激等均發(fā)生明顯的激活反應(yīng)。我們的實(shí)驗(yàn)中在8個(gè)SRD神經(jīng)元觀察了80mmHg直結(jié)腸擴(kuò)張(CRD)刺激引起的神經(jīng)元的反應(yīng),神經(jīng)元從背景活動(dòng)的2.85±1.72spik

31、es／s增加到10.53±3.81spikes／s,增加率是背景活動(dòng)的202.1±5.89％。如下圖所示,80mmHgCRD刺激后與刺激前的空白對(duì)照組相比有非常顯著的差異(P<0.001)。表明內(nèi)臟傷害性強(qiáng)度的傳入能明顯激活SRD神經(jīng)元。
　　 我們發(fā)現(xiàn)當(dāng)CRD引起穩(wěn)定的SRD神經(jīng)元的放電反應(yīng)之后,40℃-Φ1.0cm、40℃-Φ1.5cm兩種組合的熱灸對(duì)CRD的激活反應(yīng)都沒有任何影響；40℃-Φ2.0cm、40℃-Φ2.5cm

32、、40℃-Φ3.0cm三個(gè)組合的熱灸可以使得SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)進(jìn)一步輕微增加,但是統(tǒng)計(jì)學(xué)的結(jié)果表明這三組與對(duì)照組相比并無明顯差異(P>0.05)；當(dāng)刺激面積直徑達(dá)到3.5cm和4.0cm時(shí),我們可以看到熱灸刺激可以進(jìn)一步增加SRD的已有的激活反應(yīng)增加率分別為11±5.12％和10.21±3.56％,與對(duì)照組相比有顯著差異(P<0.05),但是40℃-Φ3.5cm與40℃-Φ4.0cm兩組刺激對(duì)SRD的激活反應(yīng)之間對(duì)比則無差異(P>0

33、.05)。
　　 與40℃的結(jié)果類似,當(dāng)刺激溫度為42℃時(shí),42℃-Φ1.0cm、42℃-Φ1.5cm兩種組合的熱灸對(duì)CRD的激活反應(yīng)都沒有任何影響；42℃-Φ2.0cm、42℃-Φ2.5cm、兩組組合的熱灸刺激可以使得SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)進(jìn)一步輕微增加,但是與對(duì)照組相比這種增加沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。當(dāng)刺激面積直徑達(dá)到3.0cm、3.5cm和4.0cm時(shí),我們可以看到熱灸刺激使得SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上分

34、別增加為10.56±4.32％、9.38±4.58％和9.27±3.94％,這三組與對(duì)照組相比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),但是42℃-Φ3.0cm、42℃-Φ3.5cm與42℃-Φ4.0cm三組之間對(duì)比則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　 當(dāng)刺激溫度達(dá)到44℃時(shí),44℃-Φ1.0cm和44℃-Φ1.5cm組合的熱灸對(duì)CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)沒有顯著影響,與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。44℃-Φ2.0cm熱灸組合可以

35、使SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上增加10.25±2.14％,與對(duì)照組相比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；再增大刺激面積,44℃-Φ2.5cm熱灸組合使SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上增加19.12±3.12％,44℃-Φ3.0cm組合可使SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上增加18.52±3.24％,44℃-Φ3.5cm熱灸組合使SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上增加22.85±2.45％,44℃-Φ4.0cm的熱灸使SRD

36、神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上增加20.14±1.45％。統(tǒng)計(jì)學(xué)的結(jié)果表明以上四組的熱灸對(duì)CRD的激活反應(yīng)影響與對(duì)照組相比均存在顯著性差異(P<0.01)。
　　 當(dāng)刺激溫度為46℃時(shí),46℃-Φ1.0cm和46℃-Φ1.5cm組合的熱灸對(duì)CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)同樣沒有影響。46℃-Φ2.0cm、46℃-Φ2.5cm、46℃-Φ3.0cm、46℃-Φ3.5cm和46℃-Φ4.0cm熱灸組合分別可使SRD神經(jīng)元在CRD

37、激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上增加19.86±2.54％、20.38±4.45％、24.85±1.54％、20.55±4.25％和21.27±2.51％。統(tǒng)計(jì)學(xué)的結(jié)果表明以上五組的熱灸對(duì)CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)的影響與對(duì)照組相比均存在顯著性差異(P<0.01)。
　　 當(dāng)刺激溫度升高為48℃時(shí),48℃-Φ1.0cm組合的熱灸能夠使對(duì)CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)進(jìn)一步輕微的增加,但是與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異。而當(dāng)刺激面積直徑達(dá)

38、到1.5cm以上之后,六個(gè)組合的熱灸刺激均可抑制由CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)。48℃-Φ1.5cm和48℃-Φ2.0cm熱灸組合分別可以使SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上下降20.34±5.31％和25.85±4.54％,這兩組的熱灸后的SRD反應(yīng)與對(duì)照組相比存在顯著性差異(P<0.01)。48℃-Φ2.5cm、48℃-Φ3.0cm、48℃-Φ3.5cm和48℃-Φ4.0cm四個(gè)組合的熱灸使得SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基

39、礎(chǔ)上分別下降41.31±3.21％、39.25±1.28％、42.57±4.10％和42.85±2.41％。統(tǒng)計(jì)學(xué)的結(jié)果表明以上四組的熱灸刺激對(duì)CRD的激活反應(yīng)影響與對(duì)照組相比均存在極顯著性差異(P<0.001)。
　　 當(dāng)刺激溫度升高為50℃時(shí),50℃-Φ1.0cm組合的熱灸能夠明顯抑制CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng),可使其放電下降18.68±3.71％,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。50℃-Φ1.5cm、50

40、℃-Φ2.0cm、50℃-Φ2.5cm、50℃-Φ3.0cm、50℃-Φ3.5cm和50℃-Φ4.0cm熱灸組合可以使SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上分別下降36.1±4.31％、46.23±5.32％、56.22±4.23％、52.52±2.32％、51.25±3.54％和46.57±6.12％,統(tǒng)計(jì)學(xué)的結(jié)果表明以上六組熱灸刺激對(duì)CRD引起這類神經(jīng)元的興奮性反應(yīng)的抑制作用與對(duì)照組相比均存在極顯著性差異(P<0.001)。
　

41、　 當(dāng)刺激溫度升高為52℃時(shí),52℃-Φ1.0cm組合的熱灸也能夠明顯抑制CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng),可使其放電下降17.24±3.57％,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。而當(dāng)刺激面積直徑達(dá)到1.5cm以上之后,六個(gè)組合的熱灸刺激均可抑制由CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)。52℃-Φ1.5cm、52℃-Φ2.0cm、52℃-Φ2.5cm、52℃-Φ3.0cm、52℃-Φ3.5cm、52℃-Φ4.0cm六個(gè)組合的熱灸

42、分別可使SRD神經(jīng)元在CRD激活反應(yīng)的基礎(chǔ)上下降40.67±3.12％、51.74±4.52％、50.57±4.58％、52.82±3.57％、47.82±1.52％、49.87±3.22％,統(tǒng)計(jì)學(xué)的結(jié)果表明以上六組熱灸刺激對(duì)CRD引起這類神經(jīng)元的興奮性反應(yīng)的抑制作用與對(duì)照組相比均存在極顯著性差異(P<0.001)。
　　 由以上結(jié)果,我們可以看出當(dāng)刺激溫度較低時(shí),尤其是低于普通人體的痛閾45℃時(shí),來自內(nèi)臟的傷害性傳入易化了來自

43、體表的熱灸的傳入信號(hào),導(dǎo)致SRD神經(jīng)元的進(jìn)一步激活；而當(dāng)熱灸溫度達(dá)到傷害性范圍內(nèi)時(shí),來自體表的熱灸信號(hào)對(duì)內(nèi)臟的傷害性傳入產(chǎn)生了抑制作用。
　　 為了研究熱敏化腧穴致敏前后不同參數(shù)熱灸對(duì)會(huì)聚神經(jīng)元激活強(qiáng)度的差異,闡明熱敏化腧穴是否在病理情況下導(dǎo)致了致敏以及其致敏的強(qiáng)度,首先觀察給予大鼠單純熱灸刺激所引起的SRD神經(jīng)元的反應(yīng)；之后停止熱灸,待細(xì)胞放電基本恢復(fù)后,給予大鼠持續(xù)5min以上的傷害性CRD刺激,觀察SRD神經(jīng)元對(duì)長(zhǎng)時(shí)間單純

44、CRD刺激的反應(yīng),之后停止CRD,等待10min左右,待細(xì)胞放電基本恢復(fù)后,再給予大鼠與CRD前刺激強(qiáng)度相同的熱灸刺激,觀察SRD神經(jīng)元的反應(yīng)。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　 參照前面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們選擇了部分組合的熱灸來進(jìn)行此部分實(shí)驗(yàn),首先觀察了40℃的三種熱灸組合(40℃-Φ1.0cm、40℃-Φ2.0cm、40℃-Φ4.0cm)對(duì)SRD神經(jīng)元的激活效應(yīng)。我們發(fā)現(xiàn)這三種組合的熱灸在CRD之前都不能激活SRD神經(jīng)元。如前所述,CR

45、D能夠很好地激活SRD神經(jīng)元,與對(duì)照組相比有顯著差異(P<0.01)。而當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間CRD結(jié)束后,我們發(fā)現(xiàn)再次施加40℃-Φ1.0cm組合熱灸,SRD神經(jīng)元的反應(yīng)有輕微增加,但統(tǒng)計(jì)學(xué)的結(jié)果表明與對(duì)照組相比并無差異。而40℃-Φ2.0cm熱灸組合在CRD之后則可以使SRD神經(jīng)元的反應(yīng)顯著增加(P<0.05)。40℃-Φ4.0cm熱灸組合的結(jié)果與40℃-Φ2.0cm類似,長(zhǎng)時(shí)間CRD結(jié)束之后再給予大鼠熱灸可使得SRD神經(jīng)元的反應(yīng)顯著增加(P<0

46、.05)。但是CRD后的40℃-Φ2.0cm和40℃-Φ4.0cm兩個(gè)組合的熱灸的激活作用相比較,二者沒有顯著差異(P>0.05)。
　　 當(dāng)刺激溫度為44℃時(shí),三種刺激面積的熱灸在CRD之前都不能激活SRD神經(jīng)元。而在較長(zhǎng)時(shí)間的CRD刺激之后,三個(gè)組合的熱灸均能使SRD神經(jīng)元產(chǎn)生興奮性反應(yīng)。44℃-Φ1.0cm組合引起的SRD的激活反應(yīng)是對(duì)照組的108±1.21％,二者有明顯差異(P<0.05)；44℃-Φ2.0cm組合的熱灸

47、引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)是對(duì)照組的112±1.13％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示二者之間存在顯著差異(P<0.01):44℃-Φ4.0cm組合的熱灸引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)是對(duì)照組的113±2.34％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示二者之間存在顯著差異(P<0.01):但是44℃-Φ2.0cm與44℃-Φ4.0cm相比二者不存在顯著差異(P>0.05)。
　　 當(dāng)刺激溫度為48℃時(shí),48℃-Φ1.0cm的熱灸在CRD之前能輕微地激活SRD神經(jīng)元,但

48、是與背景放電相比二者沒有差異(P>0.05),而在較長(zhǎng)時(shí)間的CRD刺激之后,三個(gè)組合的熱灸均能使SRD神經(jīng)元產(chǎn)生興奮性反應(yīng)。48℃-Φ1.0em組合引起的SRD的激活反應(yīng)是CRD前對(duì)照組的110±0.21％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示二者有明顯差異(P<0.05)；48℃-Φ2.0cm組合的熱灸在CRD之前引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)是空白對(duì)照組的112±1.13％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示二者之間存在顯著差異(P<0.01),而在CRD之后48℃-Φ2.0

49、cm組合的熱灸可以使SRD神經(jīng)元放電增加為對(duì)照組的124±1.45％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果表明二者存在極顯著的差異(P<0.01),而CRD后熱灸對(duì)SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)與CRD前熱灸相比存在明顯差異(P<0.05)；48℃-Φ2.0cm組合的熱灸在CRD之后引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)是空白對(duì)照組的116±0.35％,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示二者之間存在顯著差異(P<0.01),而與CRD前的熱灸效應(yīng)相比也存在顯著差異(P<0.05)。
　　 3

50、結(jié)論
　　 本項(xiàng)研究系統(tǒng)分析了體表熱灸感覺傳入和內(nèi)臟傷害性傳入在脊髓水平的背角會(huì)聚神經(jīng)元、延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核發(fā)生的相互作用,得出結(jié)論如下:體表特定參數(shù)的熱灸能夠很好地抑制內(nèi)臟傷害性反應(yīng)。只有當(dāng)溫度和面積都達(dá)到一定的水平時(shí),熱灸的這種抑制作用才最明顯,但不是面積越大、溫度越高熱灸的抑制作用越好,根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們認(rèn)為刺激溫度在46～48℃范圍內(nèi),刺激面積直徑在2.0～3.0cm范圍內(nèi)就能夠取得良好的治療效果。從抑制的強(qiáng)度來看,在