口服貝殼杉烷類化合物(STV-1Na)對(duì)心肌梗死大鼠的心臟保護(hù)作用.pdf

1、背景：冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(Coronary atherosclerotic heart disease，CHD)為目前導(dǎo)致發(fā)達(dá)國(guó)家人口死亡的主要原因之一。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展及人們飲食習(xí)慣的改變，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的發(fā)病率及死亡率均有持續(xù)上升趨勢(shì)。而心肌梗死作為冠心病主要的發(fā)病形式之一，具有發(fā)病急、進(jìn)展快及預(yù)后差等特點(diǎn)，心肌梗死后出現(xiàn)的惡性心律失常及頑固性心功能衰竭為其后期死亡的主要因素。正因?yàn)樵摷膊〉奈：π裕绾晤A(yù)防及治療心肌梗

2、死，改善心肌梗死后心功能低下及心肌缺血情況等成為目前醫(yī)學(xué)上研究的熱點(diǎn)及難點(diǎn)。
　　 目前心肌梗死的首要治療為心肌的再灌注治療，即溶栓治療及經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈的介入治療(percutaneous coronary intervention，PCI)。然而在急性心肌梗死的早期能實(shí)現(xiàn)再灌注比率是極為低的，大部分的心梗病人都得不到及時(shí)的早期再灌注治療而導(dǎo)致心肌持續(xù)缺血并最終壞死。而目前用于治療心肌梗死的藥物中在抗心肌缺血、改善心功能方面具有明

3、確療效的卻極為缺乏，因此尋求一種高效的、低毒、副反應(yīng)少的抗心肌缺血、改善心功能的藥物成為目前心肌梗死治療上迫切需要。
　　 STV-1Na為東莞市凱法生物醫(yī)藥有限公司研發(fā)的具有獨(dú)立知識(shí)產(chǎn)權(quán)的生物制劑，是由甜菊糖甙中提取的一個(gè)化學(xué)單體，化學(xué)名為異甜菊醇(isosteviol)。低劑量的異甜菊醇(isosteviol)具有抗心律失常、抗心肌缺血及增強(qiáng)心肌收縮力等心臟保護(hù)作用，并且異甜菊醇作為甜葉菊的提取物之一，為天然的生物提取物，具

4、有來源豐富、低毒、副反應(yīng)少等特點(diǎn)。作為一類心肌保護(hù)作用的新藥進(jìn)行開發(fā)，具有重要意義。
　　 目的：
　　 1．觀察口服STV-1Na對(duì)心肌梗死大鼠的心臟保護(hù)作用。
　　 2．初步探討STV-1Na對(duì)心肌梗死大鼠的心臟保護(hù)作用機(jī)制。
　　 方法：將180只SPF級(jí)SD大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham group，S)、心肌梗死模型的空白對(duì)照組(Myocardial Infraction，MI)、S

5、TV-1Na低劑量組(Myocardial infraction low dose group，ML)、中劑量組(Myocardial infraction middle does，MM)及高劑量組(Myocardialinfraction high dose group，MH)，曲美他嗪組(Myocardial infraction Trimetazidine group，MT)。其中假手術(shù)組只穿線、不結(jié)扎，其他各組均造心肌梗死模型，

6、其中空白對(duì)照組在結(jié)扎前10min，結(jié)扎后每天兩次灌胃給予生理鹽水(按2ml/kg給予)；STV-1Na低劑量組、中劑量組、高劑量組分別按0.5mg/kg、1mg/kg及4mg/kg的劑量灌胃給藥，給藥方式與空白對(duì)照組相同；曲美他嗪(Trimetazidine)為本實(shí)驗(yàn)的陽性對(duì)照藥，在結(jié)扎前1h給藥及結(jié)扎后每天給藥兩次，給藥濃度為3mg/kg(按人的有效劑量換算)。檢測(cè)冠脈結(jié)扎后8h、24h、48h血清心肌肌鈣蛋白I(Cardial tr

7、oponin I，cTnl)濃度，在連續(xù)給藥1周、2周、4周后測(cè)量各項(xiàng)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，即平均動(dòng)脈壓(mean blood pressure，MBP)、心率(heart rate，HR)、大鼠收縮期心室壓力最大上升速率(+dp/dtmax)及舒張期左室壓力最大下降速率(-dp/dtmax)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)檢測(cè)心肌梗死面積、心肌細(xì)胞凋亡等指標(biāo)，以觀察STV-1Na對(duì)心肌梗死大鼠的心肌保護(hù)作用。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(

8、-x±s)表示，進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。正態(tài)分布資料，組間比較用One-Way ANOVA單因素方差分析，兩兩比較用LSD-t(leastsignificant difference，LSD-t)檢驗(yàn)，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1．在冠脈結(jié)扎后，空白對(duì)照組、STV-1Na各劑量組及曲美他嗪組與假手術(shù)組相比，在術(shù)后24h血清心肌肌鈣蛋白l(cTnl)明顯升高，心肌收縮功能及舒張功能明顯降低，心肌梗死面積明顯

9、增大。
　　 2．在心肌梗死治療1周后，STV-1Na中劑量、高劑量組及去曲美他嗪組與空白對(duì)照組相比能夠顯著增加大鼠+dp/dtmax(P＜0.05)。而STV-1Na低劑量組在治療1周時(shí)+dp/dtmax與空白對(duì)照組的+dp/dtmax相比無顯著差異(P＞0.05)[MI(6702±1040mmHg/s),ML(7276±700mmHg/s),MM(7782±618mmHg/s),MH(7729±545mmHg/s)，MT(7

10、535±837mmHg/s)]。心梗后1周時(shí)，STV-1Na的各劑量組及曲美他嗪組的-dp/dtmax與空白對(duì)照組間-dp/dtmax相比，并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)[Ml(5400±1071mmHg/s),ML(5690±1421mmHg/s),MM(5564±644mmHg/s),MH(5646±1000mmHg/s),MT(5511±1265mmHg/s)]。
　　 在心肌梗死治療2周后，STV-1Na各劑量組及曲美他

11、嗪組與空白對(duì)照組相比均能顯著增加+dp/dtmax(P＜0.01)[MI(5868±1302mmHg/s)，MT(8101±990mmHg/s),ML(7658±1241mmHg/s),MM(8499±1086mmHg/s),MH(7521±1217mmHg/s)1；STV-1Na低劑量、中劑量組及曲美他嗪組與空白對(duì)照組相比能夠顯著增加-dp/dtmax(P＜0.05)。而STV-1Na高劑量組在心梗后2周時(shí)的-dp/dtmax與空白對(duì)

12、照組相比并無明顯差異(P＞0.05)[MI(4750±1463mmHg/s)，MT(6514±1558mmHg/s),ML(6275±1971mmHg/s),MM(7305±1554mmHg/s),MH(5676±2026mmHg/S)]。
　　 在心肌梗死治療4周后，STV-1Na各劑量組及曲美他嗪組與空白對(duì)照組相比均能顯著增加+dp/dtmax(P＜0.01)[MI(5620±454mmHg/s)，MT(7629±1181m

13、mHg/s),ML(7264±1099mmHg/s),MM(7743±767mmHg/s),MH(7537±584mmHg/s)]。STV-1Na各劑量組及曲美他嗪組與空白對(duì)照組相比均能顯著增大-dp/dtmax[MI(4256±731mmHg/s),ML(5528±1597mmHg/s,P＜0.05),MM(6132±1686mmHg/s,P＜0.01),MH(5801±1049mmHg/s，P＜0.01),MT(5883±1379m

14、mHg/s，P＜0.01)]。
　　 3．STV-1Na在連續(xù)治療四周后，在改善心肌梗死大鼠的心功能同時(shí)心率較假手術(shù)相比并無明顯增加(P＞0.05)[S(375±33bpm)，MT(361±40bpm)，ML(380±52bpm)，MM(391±24bpm)，MH(366±23bpm)]，且平均動(dòng)脈壓均較空白對(duì)照組均有所增加(P＜0.01)[MI(87±14mmHg),MT(113±14mmHg),ML(109±18mmHg),

15、MM(124±24mmHg),MH(106±12mmHg)]。
　　 4．在心肌梗死后8小時(shí)后，各組的血清cTnl均有明顯升高，但STV-1Na各劑量組及曲美他嗪組空白對(duì)照組相比無明顯差異(P＞0.05)。然而在心肌梗死后24小時(shí)，STV-1Na各劑量組及曲美他嗪組血清cTnl均有顯著下降，而空白對(duì)照組血清cTnl仍有持續(xù)上升，治療組較空白對(duì)照組血清cTnl顯著下降(P＜0.01)[Ml(42.3±16.2ng/ml),ML(1

16、7.0±12.2ng/ml),MM(21.3±10.5ng/ml),MH(22.2±18.5ng/ ml),MT(22.7±14.9ng/ml)]。在心肌梗死后48小時(shí)，各組血清cTnl均有明顯下降，STV-1Na各劑量組血清cTnl較空白對(duì)照組下降更為顯著[MI(3.7±2.6ng/ml).ML(1.3±1.9 ng/ml,P＜0.05),MM(1.3±0.8 ng/ml,P＜0.05),MH(1.0±1.2 ng/ml,P＜0.01

17、)]，而曲美他嗪組血清cTnl在心肌梗死后48小時(shí)與空白對(duì)照組相比無顯著差異(P＞0.05)。
　　 5．STV-1Na各劑量組及曲美他嗪組與空白對(duì)照組相比均能顯著減少心肌梗死面積[MI(0.362±0.082),ML(0.284±0.076,P＜0.05),MM(0.268±0.057,P＜0.05),MH(0.254±0.034,P＜0.01),MT(0.248±0.052,P＜0.01)]。
　　 6．初步觀察到S

18、TV-1Na及曲美他嗪在心肌梗死1周時(shí)與空白對(duì)照組相比能減少心臟損傷區(qū)及缺血區(qū)的心肌細(xì)胞凋亡(P＜0.01)[MI(7.93±0.006).MT(1.50±0.004),STV-1Na(2.25±0.002)]。
　　 結(jié)論：
　　 1．STV-1Na能改善大鼠心肌梗死模型急性期和亞急性期的心臟收縮功能及舒張功能。STV-1Na中劑量組與STV-1Na低劑量組相比，其改善心肌梗死大鼠心功能的作用更為顯著。
　　

19、2．STV-1Na各劑量組與空白對(duì)照組相比，能顯著降低冠脈結(jié)扎后24小時(shí)、48小時(shí)血清cTnl水平、并可減少大鼠心肌梗死的面積，表明STV-1Na具有心肌保護(hù)作用。
　　 3．STV-1Na在心肌梗死大鼠模型中，改善大鼠心功能的同時(shí)，對(duì)心率和血壓沒有明顯影響。
　　 4．STV-1Na能夠減少心肌梗死急性期心肌損傷期及缺血區(qū)的細(xì)胞凋亡，提示STV-1Na心肌保護(hù)作用的機(jī)制之一，可能是通過抑制心肌缺血誘發(fā)的細(xì)胞凋亡，減少了