貝殼杉烷型二萜類化合物STV-1對(duì)大鼠離體心臟缺血-再灌注損傷的保護(hù)效應(yīng).pdf

1、[目的]
　　 取大鼠離體心臟，采用Langendorff灌流法，通過(guò)結(jié)扎離體心臟左冠狀動(dòng)脈30min，再灌注30min，建立缺血-再灌注損傷模型，觀察STV-1對(duì)大鼠離體心臟缺血-再灌注損傷后心功能、心肌酶、心肌組織形態(tài)等的影響，評(píng)估STV-1對(duì)缺血-再灌注損傷心肌的保護(hù)效應(yīng)。
　　 [方法]
　　 取SPF級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為5組(n=10)：正常對(duì)照組；缺血-再灌注組；STV-1低濃度組：STV-1中濃度組；

2、STV-1高濃度組。擊昏大鼠，游離心臟，懸掛于Langendorff裝置上以充氧的Krebs-Henseleit(K-H)液持續(xù)灌流，灌注壓100cmH2O，平衡20 min，待心臟處于穩(wěn)定狀態(tài)，繼續(xù)以K-H液或含不同濃度STV-1的K-H液灌流10 min(缺血前期)；通過(guò)結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈30 min造成心肌缺血(缺血期)；再灌注K-H液或含不同濃度STV-1的K-H液30 min(再灌注期)，建立缺血-再灌注損傷模型。正常對(duì)照組以K-

3、H液持續(xù)灌流。左心室插入水囊導(dǎo)管，利用Power Lab8/30記錄系統(tǒng)監(jiān)測(cè)各組血流動(dòng)力學(xué)變化，包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張術(shù)壓(LVEDP)、左室等容收縮期壓力上升最大速率(+dp/dt max)和左室等容舒張期壓力下降最大速率(-dp/dt max)等，在左室心尖和主動(dòng)脈根部安置電極，記錄大鼠心電圖并進(jìn)行分析，計(jì)算室性心動(dòng)過(guò)速和心室纖顫的持續(xù)時(shí)間；測(cè)定冠脈流量(CF)和冠脈流出液中乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶

4、(CK)的含量；以上項(xiàng)目完成后，對(duì)大鼠心臟進(jìn)行氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)溶液染色、HE染色和心肌細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)，觀察STV-1對(duì)缺血-再灌注后心肌組織形態(tài)學(xué)的影響。
　　 [結(jié)果]
　　 STV-1對(duì)大鼠離體心臟缺血-再灌注損傷心功能的影響
　　 血流動(dòng)力學(xué)改變：缺血-再灌注組缺血期的LVSP、+dp/dt max和-dp/dt max均明顯小于正常對(duì)照組，LVEDP則大于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.

5、01)；STV-1各組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的LVSP、+dp/dt max和-dp/dt max大于缺血-再灌注組，LVEDP小于缺血-再灌注組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。再灌注后，STV-1各組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的LVSP、+dp/dt max和-dp/dt max均明顯大于缺血-再灌注組，LVEDP小于缺血-再灌注組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。各組在缺血前期、缺血期和再灌注期的心率變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　

6、心律變化：缺血-再灌注組在缺血期間就出現(xiàn)室性早搏、室性心動(dòng)過(guò)速等心律失常；再灌注期間心率變慢，頻發(fā)室性早搏、室性心動(dòng)過(guò)速甚至心室纖顫等心律失常。經(jīng)STV-1灌流預(yù)處理后的各組心臟，無(wú)論缺血期或再灌注期，出現(xiàn)心律失常的時(shí)間均較晚，程度也較輕，偶發(fā)室性早搏，室性心動(dòng)過(guò)速和心室纖顫發(fā)生次數(shù)減少，持續(xù)時(shí)間縮短(P<0.01)。
　　 冠脈流量的變化：缺血-再灌注組和STV-1各組缺血期和再灌注期的冠脈流量明顯小于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、意義(P<0.01)；STV-1各組缺血期和再灌注期的冠脈流量大于缺血-再灌注組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 STV-1對(duì)大鼠離體心臟缺血-再灌注損傷心肌酶的影響
　　 缺血-再灌注組和STV-1各組缺血期術(shù)的乳酸脫氫酶和肌酸激酶的含量均較缺血前升高，再灌注期末進(jìn)一步升高，再灌注期術(shù)與缺血期術(shù)，缺血期末與缺血前比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；STV-1各組缺血期末和再灌注期末的乳酸脫氫酶和肌酸激

8、酶的含量均較缺血-再灌注組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 STV-1對(duì)大鼠離體心臟缺血-再灌注損傷心肌組織形態(tài)的影響
　　 缺血-再灌注組的心肌梗死范圍為(41.99±7.28)％，STV-1低、中、高濃度組的心肌梗死范圍分別是(35.74±7.21)％、(25.02±3.81)％和(23.59±6.07)％，均小于缺血-再灌注組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 光鏡下觀察，缺血-再灌注組

9、心肌纖維排列紊亂，部分肌纖維斷裂，細(xì)胞腫脹甚至出現(xiàn)片狀壞死，周圍有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和紅細(xì)胞凝集。STV-1各組的心肌細(xì)胞損傷明顯減輕，僅見少量心肌纖維斷裂。
　　 STV-1低、中、高濃度組的心肌細(xì)胞平均凋亡率分別為(8.32±1.27)％、(5.11±2.12)％和(3.05±0.98)％，低于缺血-再灌注組(14.29±5.59)％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 本研究證實(shí)：STV-1