嗜酸乳桿菌素的初步研究.pdf

1、該文初步研究了嗜酸乳桿菌的生物學(xué)特性及其產(chǎn)生的細(xì)菌素分離、純化、鑒定和部分特性.初步研究了采用硫酸銨鹽析粗提嗜酸乳桿菌素的方法,確定的提取條件為:培養(yǎng)液于75℃下保溫25min,離心(7℃、7000×g、15min)取上清液,用10％NaOH將pH值調(diào)至8,緩慢加入硫酸銨至飽和度為80％,磁力攪拌2小時(shí),離心(7℃、10000×g、20min),沉淀懸浮于無(wú)菌水中,采用截留分子量為1000的透析袋透析.為了進(jìn)一步鑒定細(xì)菌素采用了SDS-

2、PAGE,確定的電泳條件為:分離膠濃度16.5％,交聯(lián)度6％,6M尿素;濃縮膠濃度5％,交聯(lián)度3％;恒流電流20mA,起始電壓140~160V,逐漸升至180~200V;培養(yǎng)液濃縮100倍上樣量為10μl .得到的細(xì)菌素經(jīng)SDS-PAGE顯示出單帶,L.acidophilus ND產(chǎn)生的細(xì)菌素分子量略小于3.5KDa,而L.Acidophilus WS產(chǎn)生的細(xì)菌素約為3.5KDa,對(duì)金黃色葡萄球菌具有抗性.通過(guò)單因子試驗(yàn)研究了影響兩株嗜

3、酸乳桿菌產(chǎn)生細(xì)菌素的因素,結(jié)果表明:①蛋白胨的種類對(duì)嗜酸乳桿菌產(chǎn)生細(xì)菌素有較大影響,采用魚(yú)蛋白胨配制成的MRS液體培養(yǎng)基培養(yǎng)L.acidophilus時(shí),L.acidophilus生長(zhǎng)極為緩慢,說(shuō)明該蛋白胨不適合于L.acidophilus的生長(zhǎng)和產(chǎn)生細(xì)菌素;以干酪素為氮源制作MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)L.acidophilus時(shí),其代謝產(chǎn)物中含有大量的蛋白質(zhì),而且有很大一部分來(lái)源于培養(yǎng)基,產(chǎn)物難以提純;采用動(dòng)物蛋白胨配制成MRS液體培養(yǎng)基培養(yǎng)L