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文檔簡介
1、支氣管哮喘是一種全球性疾病,無地域和種族的局限性,也無年齡和性別的明顯差異。哮喘是以氣道阻塞,支氣管炎癥以及氣道重塑為特征。呼吸道重塑過程中基底膜與平滑肌增厚是哮喘不易根治的重要原因,故預防和逆轉哮喘的氣道重建具有重要意義。據中醫(yī)古籍記載,三氧化二砷具有根治哮喘的奇效。近年來,國內有少量關于三氧化二砷治療哮喘的相關動物實驗研究,主要集中于誘導炎癥細胞凋亡方面,對于慢性哮喘氣道重塑的干預尚無相關報道。
目的:
2、探討預防和治療支氣管哮喘氣道重塑的新途徑。
方法:
1、建立動物模型:建立哮喘氣道重塑的小鼠動物模型,將40只成熟雌性清潔級BABL/c小鼠隨機分為健康對照(A)組、哮喘模型(B)組、地塞米松干預(C)組和三氧化二砷干預(D)組,于0、7、14天A組小鼠腹腔注射生理鹽水,B、C、D組小鼠腹腔注射卵清蛋白(OVA)和氫氧化鋁凝膠混懸液共3次,致敏1周后開始A組用生理鹽水霧化激發(fā),B、C、D組以1%的OVA霧化激
3、發(fā),每天霧化30分鐘,每周2次,持續(xù)8周,藥物干預組每次霧化前分別予以地塞米松2mg/Kg和三氧化二砷(As2O3)4mg/Kg腹腔注射;
2、模型最后一次激發(fā)后24 h內測定肺功能指標(氣道阻力RL和肺動態(tài)順應性Cdyn),然后處死小鼠,采集動物支氣管、肺組織;應用HE染色,觀察支氣管、肺組織的病理形態(tài)改變,應用圖象分析系統(tǒng)測定氣道內周長(Pi)、氣道管壁總面積(WAt)、氣道壁平滑肌面積(WAm),支氣管平滑肌細胞核數(shù)
4、(N),將測得的WAt、WAm、N用Pi進行標準化,分別以WAt/Pi、WAm/Pi、N/Pi表示;
3、應用免疫組化法檢測各組肺組織中的轉化生長因子β1(TGF-β1)、血管內皮生長因子(VEGF)、基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白表達;應用逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)法檢測各組肺組織中的TGF-β1mRNA、VEGFmRNA、MMP-9mRNA表達水平。
結果:
致敏小鼠經過
5、8周過敏原激發(fā)后,哮喘組小鼠在組織病理學、肺功能和病理形態(tài)學方面發(fā)生了較典型的慢性哮喘樣改變;激素組和三氧化二砷組小鼠的肺功能指標及肺部改變介于慢性哮喘組和正常對照組之間;激素組和三氧化二砷組之間無顯著差異。
哮喘組小鼠肺組織中TGF-β1、VEGF、MMP-9的蛋白和TGF-β1mRNA、VEGFmRNA、MMP-9mRNA的表達增強。與哮喘組相比,激素組和三氧化二砷組肺組織中TGF-β1、 VEGF、MMP-9的蛋白和
6、TGF-β1mRNA、VEGFmRNA、MMP-9mRNA的表達減弱,但仍強于正常對照組.
結論:
致敏后給予8周過敏原激發(fā)可以制造出哮喘氣道重塑模型;哮喘組小鼠肺組織中TGF-β1、VEGF、MMP-9表達均明顯增強,提示其均參與慢性哮喘氣道重塑的形成過程;而三氧化二砷組和激素組TGF-β1、VEGF、MMP-9表達均明顯減弱,小鼠哮喘氣道重塑亦明顯減輕,提示激素和三氧化二砷均可抑制慢性哮喘的氣道重塑過程,
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