Ccd1基因發(fā)育表達(dá)譜和初步功能研究.pdf

1、人Ccd1基因是從胎腦中分離出的一個新基因，定位于染色體11q23.1，在D11S1391和D11S1347位點(diǎn)之間?；蚪M序列大約為44.58kb，含有17個外顯子，mRNA全長4803bp，含一個1419bp的完整開放閱讀框，編碼472個氨基酸，分子量為53.8kDa的蛋白質(zhì)[1，2]。保守區(qū)分析表明，Ccd1蛋白具有一個螺旋-螺旋結(jié)構(gòu)域和一個Dishevelled-Axin(DIX)結(jié)構(gòu)域，分別位于氨基酸殘基120-250，390

2、-472。 Ccd1同源蛋白只在脊椎動物中存在而且相當(dāng)保守。目前只在斑馬魚Ccd1同源基因中得到研究，研究發(fā)現(xiàn)Ccd1在斑馬魚的神經(jīng)模式化過程中起重要作用[3]。和其同源基因類似，小鼠Ccd1在發(fā)育早期也是廣泛表達(dá)，在11.5天胚胎中分別在中腦、眼原基、菱腦、端腦、間腦和脊髓等部位表達(dá)，而在非神經(jīng)組織未檢測到表達(dá)信號。利用原位雜交、免疫組化和Western分析表明小鼠Ccd1基因從胚胎11.5開始到新生早期都主要集中于神經(jīng)系統(tǒng)

3、表達(dá)，這提示Ccd1的主要功能是參與神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育。 為了研究Ccd1是如何在神經(jīng)發(fā)育過程中起作用，我們利用過表達(dá)和RNA干涉技術(shù)研究了維甲酸誘導(dǎo)下P19細(xì)胞向神經(jīng)元分化過程中Ccd1的作用，結(jié)果表明Ccd1促進(jìn)神經(jīng)分化。為了進(jìn)一步研究Ccd1促進(jìn)神經(jīng)分化的機(jī)制，我們利用酵母雙雜交篩選到4個可能的相互作用蛋白，經(jīng)過共定位研究表明其中的一個蛋白SH3BP5與Ccd1有強(qiáng)的共定位信號。SH3BP5是通過JNK通路在細(xì)胞凋亡中發(fā)揮功