枇杷果實(shí)品質(zhì)分析及CCD1基因克隆與表達(dá)研究.pdf

1、枇杷（Eriobotrya japonica Lindl）為原產(chǎn)我國的常綠果樹，按照果肉顏色不同可分為紅沙和白沙兩大類。枇杷果實(shí)色澤艷麗，果肉柔軟多汁，營養(yǎng)豐富，目前關(guān)于其品質(zhì)的研究以糖酸代謝、類胡蘿卜素積累為主，而關(guān)于香氣的研究較少。本研究以枇杷果實(shí)為試材，在分析測(cè)定基礎(chǔ)品質(zhì)指標(biāo)、色澤指標(biāo)的基礎(chǔ)上，對(duì)不同品種枇杷成熟果實(shí)及不同發(fā)育期果實(shí)果肉香氣進(jìn)行分析，并進(jìn)行枇杷果實(shí)CCD1基因克隆和表達(dá)研究，主要研究結(jié)果如下:
　　1、對(duì)20

2、11年采集的3個(gè)紅沙和12個(gè)白沙品種枇杷成熟期果實(shí)的品質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示“大五星”單果重和縱橫徑平均值最大，最小的是“冰糖種”;紅沙品種可溶性固形物普遍比白沙品種低，其中“雞蛋白”含量最高，“大五星”含量最低。2012年采集的發(fā)育過程中的果實(shí)樣品測(cè)試數(shù)據(jù)顯示出5月4日“金豐一號(hào)”和“冠玉”同時(shí)進(jìn)入快速發(fā)育期，果實(shí)重量和縱橫徑在成熟前1-2周就達(dá)到了品種固有大小，成熟的“金豐一號(hào)”平均值為37.75 g，“冠玉”果實(shí)平均值達(dá)到39.96

3、 g。色差分析顯示紅沙品種果皮和果肉明亮度均低于白沙品種，顏色更接近于黃色。
　　果實(shí)芳香成分GC-MS檢測(cè)分析結(jié)果表明，15個(gè)枇杷品種均以醇類平均含量最高，其次是醛類，紅沙和白沙品種醇類含量平均值分別達(dá)到47.7％和53.63％，在較普遍存在的物質(zhì)中反式-2-異氰基環(huán)己醇和苯甲醛為紅沙和白沙枇杷共有?！敖鹭S一號(hào)”和“冠玉”果實(shí)發(fā)育過程中分別檢測(cè)到24種和32種香氣物質(zhì)，“金豐一號(hào)”7個(gè)時(shí)期樣品中平均含量最高的是醛類，其次是酸類和

4、醇類，分別為0.937μg·g-1、0.304μg·g-1、0.163μg·g-1;不同時(shí)期共有的成分是己醛，其次存在較普遍的是苯甲醛和2-己烯醛;“冠玉”不同發(fā)育時(shí)期樣品中也是醛類總含量最高，醇類次之，以苯甲醛和2-己烯醛最為普遍存在，其中2-己烯醛的平均含量最高，苯甲醛次之;兩品種果實(shí)中醛類和醇類總含量最大值同在4月19日樣品中出現(xiàn)，反式-2-己烯-1-醇和正己醇最為普遍存在。
　　2、克隆獲得枇杷CCD1基因全長，命名為Ej

5、CCD1，該cDNA全長1735 bp，有一個(gè)完整的1518bp的開放閱讀框，編碼由506個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)，GenBank登錄號(hào)為JQ317781;此外，克隆得到枇杷CCD4基因3'端片段，命名為EjCCD4，該cDNA片段長1405 bp，包含一個(gè)1308 bp的開放閱讀框，可編碼436個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)片段，GenBank登錄號(hào)為JQ317782。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行“金豐一號(hào)”和“冠玉”枇杷不同發(fā)育時(shí)期果肉EjCCD1