去甲萬古霉素HPLC法和EMIT法測定方法的比較及患者血藥濃度監(jiān)測結(jié)果的相關(guān)分析研究.pdf

1、去甲萬古霉素屬糖肽類抗生素，其化學(xué)結(jié)構(gòu)與萬古霉素相近，抗菌譜和抗菌作用與萬古霉素相仿。糖肽類抗生素，是治療革蘭氏陽性菌尤其是耐甲氧西林金葡菌(MRSA)感染的首選藥物。隨著耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)引起的感染日漸增多，去甲萬古霉素的應(yīng)用越來越頻繁。去甲萬古霉素不良反應(yīng)大，治療窗較窄。因此，在臨床使用過程中，對其進行血藥濃度監(jiān)測十分必要。目前，去甲萬古霉素的測定方法有熒光免疫偏振法(FPIA)、

2、高效液相色譜法（HPLC），還有少數(shù)實驗者用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)、酶免疫放大法(EMIT)等，各具優(yōu)缺點。日常監(jiān)測中需要一種簡便、快捷、準(zhǔn)確的測定方法。
　　目的:分別建立HPLC法和EMIT法測定血漿中去甲萬古霉素濃度的方法，比較HPLC法和EMIT法測定患者血漿中去甲萬古霉素濃度的方法學(xué)相關(guān)性。對監(jiān)測結(jié)果進行相關(guān)性分析研究，為臨床去甲萬古霉素的合理使用提供理論依據(jù)。
　　方法:不同測定方法的比較

3、:分別采用HPLC法和EMIT法建立了血漿中去甲萬古霉素濃度的測定方法，并分別驗證這兩種方法的精密度與準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性。收集使用過去甲萬古霉素患者的血漿樣本，分別用HPLC法和EMIT法對其濃度進行測定，對測定結(jié)果進行回歸分析，比較相關(guān)性。
　　患者血藥濃度監(jiān)測結(jié)果的相關(guān)性分析研究:用EMIT法測定105例血漿樣本中去甲萬古霉素的濃度，并與年齡、腎功能以及基礎(chǔ)疾病等進行相關(guān)性比較分析。
　　結(jié)果:HPLC法去甲萬古霉素和萬古霉

4、素的保留時間分別為8.0min，11.0min。標(biāo)準(zhǔn)曲線為:Y=0.0207C-0.0003，r=0.9997，線性范圍為2～100μg/ml，最低檢測濃度為2μg/ml。低、中、高3種濃度(4、40、80μg/ml)的平均提取回收率(％)分別為101.6±10.09，107.2±2.23，107.7±1.53，日間、日內(nèi)RSD均小于15％。EMIT法標(biāo)準(zhǔn)曲線:Y=-3.4×10-7C3-9.5×10-6C2+0.0042C+0.303

5、4，r=0.9999，線性范圍為2～50μg/ml，最低檢測濃度為2μg/ml。HPLC法和EMIT法測定去甲萬古霉素樣品結(jié)果線性回歸方程為Y=0.9395X-1.934(Y: EMIT法μg/ml，X: HPLC法μg/ml)，r=0.9217。兩組數(shù)據(jù)配對t檢驗結(jié)果:P＞0.05。血肌酐正常組與大于正常值組比較，P＜0.05。年齡60～75歲組和＞75歲組比較，P＜0.05。
　　結(jié)論:HPLC法測定血漿去甲萬古霉素和EMIT