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文檔簡介
1、目的:
通過檢測慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者血清中干擾素λs(Interferon-λ,IFN-λ,包括IFN-λ1,IFN-λ2和IFN-λ3)的表達,并根據(jù)血清乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)濃度和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)濃度進行具體分組分析,探討慢性HBV感染者血清中IFN-λs表達與HBeAg和HBV DNA濃度的關(guān)系,為深入了解IFN-λs在HBV感染者體內(nèi)表達調(diào)控特
2、點及機制提供理論依據(jù)。
方法:
1.臨床標本收集:選取2014年1月-2016年02月在山東省千佛山醫(yī)院住院的慢性HBV感染者80例作為實驗組,其中又根據(jù)HBVDNA定量和HBeAg結(jié)果進行具體分組,PCR檢測血清HBV DNA濃度,低于檢測下限者(<100IU/ml)為HBV DNA陰性組,HBV DNA陽性組和HBV DNA陰性組各40例,其中又分別包括HBeAg陽性組和HBeAg陰性組各20例,并且根據(jù)HBV
3、DNA濃度梯度分布進行分組分析,另選取20例健康志愿者靜脈血作為對照組。用雙抗體夾心ELISA法分別檢測血清中IFN-λs(含IFN-λ1、IFN-λ2、IFN-λ3)水平,分析血清IFN-λs表達與HBV DNA、HBeAg濃度的關(guān)系。
2.HBV DNA測定:以PCR-熒光探針法檢測血清HBV DNA,最低檢測下限為100 IU/ml,嚴格按照ABI Prism7300設(shè)定程序進行擴增。
3.血清HBV標志物檢測
4、:HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe及抗-HBc均用cobase601全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測。
4.IFN-λs濃度測定:以ELISA法檢測血清IFN-λ1、IFN-λ2和IFN-λ3濃度,試劑盒購自上海源葉股份有限公司,具體操作嚴格按說明進行。
5.統(tǒng)計學(xué)分析:采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,其中計量資料采用均數(shù)±標準差((x)±s)表示,兩組間均數(shù)的比較采用獨立樣本t檢驗(In
5、dependent-Sample t Test)的方法,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果:
1.與正常對照組相比較,慢性HBV感染組中IFN-λs的表達水平均明顯升高,P均<0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.HBV DNA陰性患者中HBeAg陽性組IFN-λs的表達水平均明顯高于HBeAg陰性組,P均<0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
3.HBV DNA陽性患者中,HBeAg陽性組與HBeAg
6、陰性組IFN-λs的表達水平未見顯著差異(P>0.05);
4.HBeAg陽性患者中HBV DNA陽性組IFN-λs表達水平均明顯低于HBVDNA陰性組(P均<0.01),且HBV DNA陽性患者中,當(dāng)HBV DNA濃度高于108時,IFN-λs水平均明顯降低(P均<0.05)。
結(jié)論:
1.本研究慢性HBV感染組IFN-λs表達水平明顯高于正常對照組,提示慢性HBV感染可能刺激機體自身IFN-λs的表達。
7、
2.當(dāng)HBV DNA陰性時,HBeAg陽性組IFN-λs的表達水平均明顯高于HBeAg陰性組,提示當(dāng)HBV DNA低于檢測下限時,HBeAg陽性組體內(nèi)可能仍有HBV的低度復(fù)制,且能夠刺激IFN-λs的表達。
3.本研究HBV DNA陽性時HBeAg陽性組與HBeAg陰性組IFN-λs的表達水平未見顯著差異,HBeAg陽性患者中,HBVDNA濃度高于108時,IFN-λs表達水平顯著下降,提示體內(nèi)HBV DNA的低度
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