DPT過表達(dá)與小鼠睪丸功能障礙的關(guān)系研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br>　　Dermatopontin(DPT)是一種22 kDa的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，具有促進(jìn)細(xì)胞粘附和細(xì)胞外基質(zhì)形成的功能。本課題組在之前的研究中已證實(shí)DPT在睪丸組織的Sertoli細(xì)胞中存在表達(dá)，同時(shí)體外實(shí)驗(yàn)顯示，在 CdCl2誘導(dǎo)的小鼠睪丸 Sertoli細(xì)胞功能障礙模型中 DPT對(duì)claudin-11的表達(dá)具有調(diào)節(jié)作用，這提示DPT可能與睪丸功能障礙有關(guān)。為此，本研究旨在進(jìn)一步通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)揭示 DPT的表達(dá)與小鼠睪丸功

2、能障礙的關(guān)系。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　1.利用腹腔注射busulfan構(gòu)建小鼠睪丸功能障礙模型。
　　2. PCR和Western blotting方法分析小鼠睪丸組織中DPT的表達(dá)情況。
　　3.為了研究體內(nèi)DPT過表達(dá)對(duì)睪丸功能的影響，我們構(gòu)建了DPT過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠模型。
　　4.運(yùn)用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)DPT過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠模型中睪丸組織DPT蛋白表達(dá)情況。
　　5.使用HE染色的方法觀察DP

3、T過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠模型中睪丸組織曲細(xì)精管的組織形態(tài)學(xué)改變。
　　6.使用Western blotting方法檢測(cè)DPT過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠模型中睪丸組織claudin-11和zonula occludens-1（ZO-1）的表達(dá)量。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.小鼠睪丸功能障礙模型中出現(xiàn)睪丸組織形態(tài)學(xué)損傷，表明小鼠睪丸功能障礙模型已成功構(gòu)建。
　　2.小鼠睪丸功能障礙模型中 DPT的表達(dá)量與睪丸功能障礙程度呈現(xiàn)正相關(guān)，表

4、明 DPT表達(dá)量的增加與小鼠睪丸功能障礙存在密切聯(lián)系。
　　3.DPT過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠模型中出現(xiàn)睪丸組織形態(tài)學(xué)損傷，進(jìn)一步證實(shí)DPT表達(dá)量的增加與小鼠睪丸功能障礙存在密切聯(lián)系。
　　4.DPT過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠模型中claudin-11和ZO-1的表達(dá)量降低，這表明DPT表達(dá)量的增加可能會(huì)損傷小鼠血睪屏障的完整性。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
　　本研究證明 DPT表達(dá)量的增加與睪丸損傷有關(guān)，可能與血睪屏障的損傷存在關(guān)聯(lián)，進(jìn)而