卒中后抑郁小鼠模型的建立及評價.pdf

1、目的：聯(lián)合應(yīng)用大腦中動脈阻塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）和空間行為限制建立卒中后抑郁動物模型，探討建立模型的最佳條件并進(jìn)一步驗證卒中后抑郁模型的符合抑郁的各項標(biāo)準(zhǔn)，將為卒中后抑郁的機制研究和臨床藥物提供一個新的模型。
　　方法：將體重28-30 g的雄性 ICR小鼠隨機分為假手術(shù)(Sham)組、假手術(shù)+應(yīng)激（Stress）組、缺血再灌注（IR）組和缺血再灌注+應(yīng)激（SIR）組，以大

2、腦中動脈阻塞方法建立小鼠缺血再灌注動物模型；每天將小鼠放進(jìn)通風(fēng)良好的50毫升試管限制其活動2小時，建立空間限制抑郁模型；聯(lián)合MCAO和空間限制方法建立中風(fēng)后抑郁模型；觀察不同缺血時間對小鼠生存率及神經(jīng)功能評分；應(yīng)用行為學(xué)實驗如強迫游泳實驗(FST)和懸尾實驗(TST)及糖水偏好實驗，觀察小鼠是否存在抑郁樣行為；采用足錯誤及抓握實驗，觀察卒中后抑郁對遠(yuǎn)期神經(jīng)功能恢復(fù)影響；應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)測定不同腦區(qū)的五羥色胺(5-HT)、多

3、巴胺(DA)等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量；采用ELISA試劑盒檢測小鼠腦組織中的腦源性神經(jīng)生長因子（BDNF）以及血清皮質(zhì)醇的含量。
　　最后，SIR組小鼠每天給予腹腔注射丙咪嗪(20mg/kg體重)和相同劑量的生理鹽水，2周后觀察行為學(xué)改變，并應(yīng)用ELISA法檢測皮質(zhì)醇的含量，采用HPLC測定丙咪嗪對腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響。
　　結(jié)果：70分鐘缺血引起較高的死亡率；50分鐘缺血小鼠的死亡率較低，但需要較長時間的空間限制才能

4、誘導(dǎo)抑郁樣癥狀。因此我們選擇60分鐘作為 MACO缺血時間。在行為空間限制的第7天，與Sham組及手術(shù)組相比，SIR組小鼠開始表現(xiàn)出不同程度的抑郁樣癥狀（糖水偏好及強迫游泳實驗，P<0.05）,第14天，懸尾實驗及強迫游泳實驗表明模型小鼠的不動時間均明顯延長；與IR組相比，SIR組小鼠蔗糖水的飲用量顯著下降；SIR組小鼠表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)功能恢復(fù)減慢（足錯誤次數(shù)明顯增多，而小鼠懸掛的時間明顯的減少，P<0.05）；SIR組小鼠的體重、腦源

5、性神經(jīng)生長因子以及腦中神經(jīng)遞質(zhì)（5-HT及 DA）的含量明顯降低，而血清中皮質(zhì)醇的含量則明顯增加,表明 SIR組小鼠存在 HPA軸系統(tǒng)的激活。丙咪嗪治療2周后，小鼠的抑郁樣行為（懸尾實驗，強迫游泳實驗）得到明顯的改善，SIR組小鼠的體重也明顯的增加，模型小鼠的5-HT水平有所增加，而血清皮質(zhì)醇的含量明顯的降低。
　　結(jié)論：我們建立的中風(fēng)后抑郁模型更好地模擬了臨床卒中病人肢體癱瘓行動受限造成的抑郁狀態(tài)，該模型能在較短時間內(nèi)出現(xiàn)，表型