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文檔簡介
1、[目的]通過體外細(xì)胞水平和體內(nèi)動物水平實(shí)驗(yàn)探討葡萄籽原花青素(GSP)對缺血性急性腎衰的預(yù)防保護(hù)作用,并對其可能機(jī)制進(jìn)行初步研究。
[方法]細(xì)胞水平:以293T細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對象,細(xì)胞分為5組:空白組、過氧化氫刺激模型組、GSP高濃度(800μg/ml)預(yù)給藥組、GSP中濃度(200μg/ml)預(yù)給藥組、GSP低濃度(50μg/ml)預(yù)給藥組。GSP預(yù)給藥組分別加入相應(yīng)濃度的GSP預(yù)孵育,空白組和模型組加入等體積的培養(yǎng)基。預(yù)孵
2、育1h后,模型組、GSP預(yù)給藥各組分別加入400μM過氧化氫,空白組加入等體積的培養(yǎng)基。孵育5h后測定細(xì)胞活力,丙二醛(MDA)、乳酸脫氫酶(LDH)、過氧化氫酶(CAT)等指標(biāo)。動物水平:健康雄性SD大鼠40只,隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組、缺血再灌注組、陽性藥卡托普利組、GSP預(yù)處理組。GSP預(yù)處理組大鼠采用GSP200mg·kg-1·d-1灌胃處理,陽性藥組大鼠采用卡托普利2.5mg·kg-1·d-1灌胃處理,假手術(shù)組、缺血再灌注組大鼠
3、均采用10ml/kg生理鹽水灌胃處理,各組均1次/天,連續(xù)給藥7天。缺血再灌注組、陽性藥卡托普利組、GSP預(yù)處理組大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉后,同時阻斷雙側(cè)腎動脈60min,再灌注24h建立大鼠缺血性急性腎衰竭的動物模型。假手術(shù)組不夾閉腎動脈,其他操作同模型組。于腎臟恢復(fù)血流24小時后取血和腎組織標(biāo)本,檢測血清尿素氮(BUN)、血肌配(Scr)、乳酸脫氫酶(LDH)、一氧化氮(NO),腎臟作HE染色觀察病理變化。
[結(jié)
4、果]細(xì)胞水平:GSP各濃度預(yù)給藥組能夠顯著提高過氧化氫刺激下的293T相對細(xì)胞活力(P<0.01),同時也可以顯著降低細(xì)胞上清液中的MDA與LDH(P<0.01)。GSP高濃度與中濃度組亦可以顯著提高細(xì)胞的CAT活力(P<0.01)。動物水平:假手術(shù)組腎臟結(jié)構(gòu)基本正常,缺血再灌注組可見明顯腎小管上皮細(xì)胞腫脹、壞死、脫落及炎性細(xì)胞浸潤。與缺血再灌注組相比較,GSP預(yù)處理組可以顯著降低血清BUN、Scr(P<0.01),血清LDH及NO水平
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