縫隙連接蛋白43在七氟醚對(duì)大鼠離體心肌缺血再灌注中的作用.pdf

1、目的：
　　觀察縫隙連接蛋白43(Cx43)分別在七氟醚預(yù)處理、七氟醚后處理保護(hù)大鼠離體心肌缺血再灌注中的作用。
　　方法：
　　1.縫隙連接蛋白43在七氟醚預(yù)處理保護(hù)大鼠離體心肌缺血再灌注中的作用。
　　健康成年雄性SD大鼠40只，體重200～250g，采用隨機(jī)數(shù)字表法將其隨機(jī)分為5組(n=8)：對(duì)照組(C組)、缺血再灌注組(IR組)、七氟醚預(yù)處理組(S組)、七氟醚混合5-羥基葵酸鈉(5-HD)組(SH組)及5

2、-HD組(H組)。大鼠離體心臟灌注使用經(jīng)典的Langendorff灌注裝置。除C組外，各組阻斷左冠狀動(dòng)脈(LAD)30min后再灌注120min建立IR模型。S組、SH組和H組分別于阻斷LAD前30min用3％七氟醚預(yù)飽和的K-H液、3％七氟醚預(yù)飽和的K-H液混合5-HD100μ mmol/L及混合5-HD100μ mmol/L的K-H液灌注15min后普通K-H液沖洗15min。分別于給藥前(T0)、給藥后15min(T1)、阻斷LA

3、D前即刻(T2)、開(kāi)放LAD前即刻(T3)、再灌注120min(T4)時(shí)記錄HR、左心室收縮壓(LVSP)、左心室舒張壓(LNDP)、左心室最大上升及下降速率(±dp/dtmax)。再灌注結(jié)束后，取左心室TTC染色測(cè)定心肌梗死體積，采用免疫組化染色觀測(cè)Cx43蛋白表達(dá)情況，采用Western Blot法檢測(cè)Cx43蛋白及磷酸化Cx43蛋白含量。
　　2.縫隙連接蛋白43在七氟醚后處理保護(hù)大鼠離體心肌缺血再灌注中的作用。
　　

4、健康成年雄性SD大鼠40只，體重200～250 g，采用隨機(jī)數(shù)字表法將其隨機(jī)分為4組(n=10)：缺血再灌注組(IR組)、七氟醚后處理組(S組)、七氟醚混合5-羥基葵酸鈉(5-HD)組(SH組)及5-HD組(H組)。采用Langendorff裝置進(jìn)行大鼠離體心臟灌注。各組均在阻斷左冠狀動(dòng)脈(LAD)前維持灌注10 min，然后阻斷LAD血流30 min后開(kāi)放，再灌注120 min，其中S、SH及H組分別于LAD開(kāi)放后使用3％七氟醚預(yù)飽和

5、的K-H液、3％預(yù)飽和的七氟醚預(yù)充飽和的K-H加5-HD(100μ mmol/L)及加入5-HD(100μ mmol/L)的K-H液灌注15min，然后使用普通K-H液繼續(xù)灌注105min。分別于阻斷LAD前即刻(T0)，開(kāi)放LAD即刻(T1)，開(kāi)放LAD后15min(T2)，開(kāi)放LAD后135min(T3)時(shí)記錄HR、左心室收縮壓(LVSP)、左心室舒張壓(LVDP)、左心室最大上升及下降速率(±dp/dtmax)。再灌注結(jié)束后，取左

6、心室TTC染色測(cè)定心肌梗死面積，采用免疫組化染色觀測(cè)Cx43蛋白表達(dá)情況，采用Western Blot法檢測(cè)Cx43蛋白及磷酸化Cx43(p-Cx43)蛋白含量。
　　結(jié)果：
　　1.與C組比較，IR組、SH組及H組的HR、LVSP、±dp/dtmax降低，LVDP升高，Cx43蛋白及磷酸化Cx43蛋白含量降低(P<0.05)；S組上述指標(biāo)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。與IR組比較，S組的HR、LVSP，±dp/dtmax升

7、高，LVDP降低，心肌梗死體積縮小，Cx43蛋白及磷酸化Cx43蛋白含量增加(P<0.05)。IR組、SH組及H組上述指標(biāo)間差異無(wú)顯著性(P>0.05)。
　　2.與IR組比較，S組的HR、LVSP、±dp/dtmax較高，LVDP降低，心肌梗死面積小，Cx43蛋白及p-Cx43蛋白含量增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。IR組與SH組及H組之間相比HR、LVSP，±dp/dtmax，LVDP，心肌梗死面積、Cx43蛋白和p-Cx