探討HECW1基因突變及其蛋白表達(dá)異常在診治泌尿系腫瘤中的臨床價(jià)值.pdf

1、目的：將第二代測(cè)序技術(shù)發(fā)現(xiàn)并篩選出的膀胱癌突變基因HECW1作為致病候選基因，利用Sanger測(cè)序技術(shù)對(duì)膀胱癌、腎癌及前列腺癌中的腫瘤組織進(jìn)行 HECW1基因突變檢測(cè)，并通過(guò)免疫組織化學(xué)法研究膀胱癌、腎癌及前列腺癌中HECW1蛋白表達(dá)，結(jié)合臨床病理資料，探索HECW1蛋白表達(dá)在診治泌尿系腫瘤中的臨床價(jià)值。
　　方法：
　　第一部分：取2013年6月至2014年12月本院手術(shù)治療的膀胱移行細(xì)胞癌患者癌組織93例，并取其中20例

2、患者的癌旁組織作為對(duì)照；取2014年1月至12月本院手術(shù)治療的腎透明細(xì)胞癌患者癌組織25例，并取相應(yīng)癌旁組織25例作為對(duì)照；取2013年12月至2014年12月本院手術(shù)治療的前列腺癌患者癌組織18例，并取相應(yīng)癌旁組織18例作為對(duì)照。將所取組織制作成蠟塊，運(yùn)用OMEGA試劑盒法提取癌組織及癌旁組織中基因組DNA，并通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）擴(kuò)增HECW1第二代測(cè)序突變位點(diǎn)附近區(qū)域DNA片

3、段，運(yùn)用Sanger測(cè)序技術(shù)對(duì)擴(kuò)增DNA片段進(jìn)行測(cè)序，分析HECW1基因突變情況。
　　第二部分：取第一部分所制造蠟塊，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法研究膀胱癌及癌旁組織、腎癌及癌旁組織和前列腺癌及癌旁組織中HECW1蛋白表達(dá)情況，并總結(jié)相關(guān)臨床病理資料，分析HECW1蛋白表達(dá)情況與各臨床病理特征間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　第一部分：（1）93例膀胱癌組織中，發(fā)現(xiàn)1例HECW1基因突變，包含2處點(diǎn)突變，且均為錯(cuò)義突變，該病例相應(yīng)癌

4、旁組織中未發(fā)現(xiàn)突變，追溯該患者原發(fā)及第一次復(fù)發(fā)手術(shù)術(shù)后病理蠟塊測(cè)序均未見(jiàn)突變；剩余92例膀胱癌組織和19例癌旁組織中均未發(fā)現(xiàn)突變。（2）25例腎癌組織及25例相應(yīng)癌旁組織中均未發(fā)現(xiàn)突變。（3）18例前列腺癌組織及18例相應(yīng)癌旁組織中均未發(fā)現(xiàn)突變。
　　第二部分：（1）膀胱癌組織和癌旁組織HECW1蛋白陽(yáng)性率分別為64.52％（60/93）和15.00%（3/20），兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；腫瘤直徑>3cm組和腫瘤

5、直徑≤3cm組陽(yáng)性率分別為84.38%（27/32）和54.10%（33/61），兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；復(fù)發(fā)組和原發(fā)組陽(yáng)性率分別為87.50%（21/24）和56.52%（39/69），兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；肌層浸潤(rùn)組和非肌層浸潤(rùn)組陽(yáng)性率分別為85.42%（41/48）和42.22%（19/45），兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。HECW1蛋白的不同表達(dá)水平與年齡、性別、腫瘤數(shù)目和病理分

6、級(jí)之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。（2）腎癌組織和癌旁組織HECW1蛋白陽(yáng)性率分別為60.00%（15/25）和84.00%（21/25），兩者之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。HECW1蛋白的不同表達(dá)水平與年齡、性別和臨床分期之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。（3）前列腺癌組織和癌旁組織HECW1蛋白陽(yáng)性率分別為83.33%（15/18）和33.33%（6/18），兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。HECW1

7、蛋白的不同表達(dá)水平與年齡、組織分化程度和病理分期之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　（1）HECW1蛋白在膀胱癌組織中的表達(dá)高于癌旁組織，HECW1蛋白的不同表達(dá)水平與膀胱癌腫瘤大小、發(fā)病頻率及浸潤(rùn)程度之間有一定的相關(guān)性；HECW1蛋白在前列腺癌組織中的表達(dá)高于癌旁組織。
　　（2）HECW1蛋白表達(dá)異常與泌尿系腫瘤的發(fā)生有一定的相關(guān)性，需要進(jìn)一步研究其功能及作用機(jī)制。
　?。?）HECW1