SOX4基因在慢性髓系白血病中的機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　研究SOX4基因在慢性髓系白血?。–ML）中的作用機(jī)制，探討SOX4基因作為CML靶點(diǎn)的可能性。
　　方法：
　　培養(yǎng)慢性髓系白血病 K562細(xì)胞，將構(gòu)建好的 siRNA-SOX4表達(dá)質(zhì)粒pLVE-1680及空載體pLVE經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)入K562細(xì)胞后檢測(cè)SOX4 mRNA和蛋白表達(dá)水平；qRT-PCR方法檢測(cè)p53、bax、c-myc、cyclinD1、bcl-2基因的表達(dá)情況；RT-PCR方法檢測(cè)Foxo3

2、a、C/EBPα基因的表達(dá)情況；CCK8法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況；基因芯片檢測(cè)干擾組和對(duì)照組中差異基因的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　RT-PCR和Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示含目的基因siRNA-SOX4的K562細(xì)胞株已成功構(gòu)建表達(dá)；siRNA SOX4-K562組C/EBPα、bax、Foxo3a、cyclinD1基因的mRNA表達(dá)量分別為0.1609±0.0095、1.2410±0.0602、1.1450±0.0461、

3、1.7240±0.0657，顯著高于K562組及K562-空載體組（P＜0.01，P＜0.05，P＜0.05，P＜0.05）；c-myc、bcl-2、p53基因mRNA表達(dá)量分別為0.9171±0.00953、0.6507±0.0090、0.4952±0.0220，顯著低于 K562組及 K562-空載體組（P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01）；結(jié)果顯示siRNASOX4-K562組細(xì)胞增殖程度顯著低于K562細(xì)胞組及 K562-

4、空載體細(xì)胞組（P＜0.05）；以差異基因2倍為限，基因芯片檢測(cè)結(jié)果干擾組較對(duì)照組升高的基因有4個(gè)，較對(duì)照組降低的基因有7個(gè)。兩組差異表達(dá)基因 Pathyway富集功能分析結(jié)果顯示最集中的pathyway是血小板激活、白細(xì)胞跨膜遷移以及病灶粘連。
　　結(jié)論：
　　SOX4基因在慢性髓系白血病中發(fā)揮癌基因的作用，在 K562細(xì)胞中干擾SOX4能夠抑制細(xì)胞增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡；基因芯片檢測(cè)結(jié)果表明SOX4可能通過(guò)下調(diào)RAP1A，上調(diào)