2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  腺苷酸活化蛋白激酶相關(guān)激酶5(ARK5)在包括肝細(xì)胞肝癌(HCC)在內(nèi)的多種腫瘤內(nèi)均高表達(dá)。腫瘤細(xì)胞內(nèi)ARK5高表達(dá)的病人的預(yù)后較差。ARK5可以促進(jìn)腫瘤的增殖,侵襲,遷移,復(fù)發(fā),但是其與腫瘤耐藥性的關(guān)系尚不清楚。本研究的目的就是觀察ARK5在肝癌對(duì)多柔比星耐藥性中的作用及其內(nèi)在機(jī)制。
  方法:
  本研究通過多柔比星處理Huh7,Hep3B,SNU449和SNU387四種肝癌細(xì)胞系,利用細(xì)胞活力檢測(cè)試劑

2、盒(CCK-8)檢測(cè)肝癌細(xì)胞系的細(xì)胞活力,蛋白免疫印跡技術(shù)(Western-blot)、免疫熒光技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ARK5、上皮間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(EdU試驗(yàn))檢測(cè)肝癌細(xì)胞系的增殖情況。ARK5siRNA干擾肝癌細(xì)胞系內(nèi)ARK5的表達(dá),觀察Huh7,Hep3B,SNU387,SNU449四種細(xì)胞系的細(xì)胞活力、增殖情況以及細(xì)胞內(nèi)上皮間質(zhì)化相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。為探討ARK5影響肝癌耐藥的機(jī)制,我們首先利用多柔比星

3、處理肝癌細(xì)胞系,再用ARK5 siRNA干擾肝癌細(xì)胞系內(nèi)ARK5的表達(dá),Wetern-blot檢測(cè)EMT相關(guān)蛋白的表達(dá);利用TWIST SiRNA干擾肝癌細(xì)胞系內(nèi)TWIST的表達(dá),再分別給予多柔比星和多柔比星+ARK5 siRNA處理肝癌細(xì)胞系,并檢測(cè)Huh7,Hep3B,SNU387,SNU449四種細(xì)胞系對(duì)多柔比星的敏感性。為了明確ARK5在低氧誘導(dǎo)的EMT的作用,ARK5siRNA處理的低氧條件培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞系Huh7、Hep3B

4、,并檢測(cè)其細(xì)胞活力、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白。
  結(jié)果:
  實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)ARK5的表達(dá)與肝癌細(xì)胞系對(duì)多柔比星的敏感性呈負(fù)相關(guān);(2) ARK5敲除后可顯著增加肝癌細(xì)胞系對(duì)多柔比星的敏感性;(3) ARK5可調(diào)控EMT相關(guān)蛋白的表達(dá);(4)干擾多柔比星處理后的肝癌細(xì)胞系中ARK5的表達(dá),可以逆轉(zhuǎn)肝癌細(xì)胞系的EMT;(5)ARK5通過TWSIT通路調(diào)控肝癌細(xì)胞系對(duì)多柔比星的耐藥性;(6)干擾低氧狀態(tài)下培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞系內(nèi)A

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