脂質(zhì)體在克服腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性中的研究.pdf

1、針對(duì)腫瘤的化療藥物的多次給藥會(huì)使得腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥性，由于腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥性嚴(yán)重影響了惡性腫瘤的治療效果，因此迫切需要新的治療方法和藥物來(lái)幫助癌癥患者延長(zhǎng)生存時(shí)間。目前，如何克服腫瘤的多藥耐藥性是攻克惡性腫瘤的重要難題。
　　脂質(zhì)體因?yàn)槠漭^好的生物可降解性和生物相容性，是臨床上較為常用的納米藥物載體。因此利用脂質(zhì)體作為逆轉(zhuǎn)卵巢癌細(xì)胞多藥耐藥性的藥物和基因載體，具有較好的臨床應(yīng)用前景。
　　針對(duì)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的問(wèn)題，

2、本論文分別從直接抑制外排泵蛋白作用和抑制耐藥基因表達(dá)的兩種角度設(shè)計(jì)制備了脂質(zhì)體藥物載體和脂質(zhì)體基因載體。
　　應(yīng)用pH-敏感型脂質(zhì)體共傳遞阿霉素和外排泵蛋白抑制劑Tariquidar克服卵巢癌細(xì)胞的耐藥性，本文成功地制備了pHSL/TQR1/DOX0.05，其DOX載藥率為5％，TQR載藥率為1％，粒徑為144±7nm，電勢(shì)為-28.1±0.7mV。體外測(cè)試表明，該脂質(zhì)體呈現(xiàn)出優(yōu)異的pH敏感釋放性質(zhì)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示，DOX濃度為8.

3、0μg/mL時(shí)，pHSL/TQR1/DOX0.05對(duì)OVCAR8/ADR的細(xì)胞活性為6.6％，對(duì)照組pHSL/DOX0.05和游離DOX溶液對(duì)OVCAR8/ADR的細(xì)胞活性分別為64.0％和43.5％，游離DOX溶液對(duì)OVCAR8的細(xì)胞活性為7.3％，可以得到當(dāng)DOX濃度為8.0μg/mL時(shí)，與對(duì)照組的抑制作用相比較，pHSL/TQR1/DOX0.05對(duì)細(xì)胞的抑制作用強(qiáng)，幾乎完全逆轉(zhuǎn)耐藥性，因?yàn)槠湟种谱饔门c游離DOX溶液對(duì)OVCAR8細(xì)

4、胞的抑制作用相當(dāng)。pHSL/TQR1/DOX0.05能夠有效地遞送阿霉素藥物進(jìn)入細(xì)胞的內(nèi)部而不被外排，從而有效地抑制了耐藥細(xì)胞OVCAR8/ADR的增殖作用。同時(shí)pHSL/TQR毒性非常低。因此，較低的載體毒性和較高的腫瘤細(xì)胞抑制作用使得pHSL/TQR1/DOX0.05是一種非常有前景的克服腫瘤多耐藥性的復(fù)合載體。
　　應(yīng)用脂質(zhì)/高分子/核酸復(fù)合物(LPD)轉(zhuǎn)染CRISPR-Cas9質(zhì)粒，以降低耐藥基因MDR的表達(dá)，進(jìn)而提高耐藥

5、細(xì)胞對(duì)抗癌藥物阿霉素的敏感性。首先成功制備包封綠色熒光蛋白(GFP)質(zhì)粒和聚乙烯亞胺(PEI，支鏈型25kDa)的LPD，并成功將其轉(zhuǎn)染至293T細(xì)胞。該脂質(zhì)體載體的的粒徑為117±6nm，電勢(shì)為43.4±0.8mV。并且當(dāng)LPD中Liposome/PEI/DNA的電荷比為1∶0.8∶1時(shí)轉(zhuǎn)染率效率達(dá)到92.7％，而陽(yáng)性對(duì)照Lipofectamine2000的轉(zhuǎn)染效率是97.8％。但是應(yīng)用LPD轉(zhuǎn)染CRISPR-Cas9質(zhì)粒進(jìn)入耐藥細(xì)胞